Современная диагностика вич в клиниках. методы определения вич инфекции у взрослых и детей

На начало XXI века медицина имеет полное право утверждать, что ВИЧ можно контролировать и даже лечить.

Главное — выявить инфекцию до того, как она нанесет непоправимый ущерб здоровью, и начать ее лечение.

Протекание болезни

Для заражения человека необходимо, чтоб возбудитель попал в кровь.

Напомним пути инфицирования:

• Половой (незащищенный секс)
• Парентеральный (общий шприц, нестерильные инструменты косметолога и так далее)
• Вертикальный или перинатальный путь заражения (от мамы к ребенку)

• Попав в кровь, вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) проникает в лимфоциты и другие клетки организма, встраивает свою РНК в их ядро.
• После этого зараженная клетка начинает продуцировать новые вирионы, начинается инфекционный процесс.
• При этом человек становится заразным спустя несколько недель после инфицирования.
• Для ВИЧ характерен очень длительный бессимптомный период.
• Клинические проявления возникают тогда, когда гибнет очень много пораженных лимфоцитов.
• И человек остается беззащитен перед другими инфекциями.
• Это — СПИД — синдром приобретенного иммунодефицита, заключительная стадия ВИЧ-инфекции.
• Сопровождается у больных поражением легких, слизистых оболочек, кишечника, центральной нервной системы.

Чем и где обследоваться

1. Обнаружить ВИЧ можно только по анализу крови.
2. Правда, сейчас есть тесты на выявление антигенов вируса в моче, однако точность их еще не безупречна.
3. Для современной медицины важно, чтоб методы диагностики соответствовали ряду важных критериев:

• Высокая точность
• Оптимальная стоимость
• Доступность для массовых исследований (скрининга)
• Возможность использования и у детей, и у взрослых

• После многих лет поиска был выработан оптимальный принцип: применение разных методик на разных этапах диагностики ВИЧ.
• Соберем в таблице характеристики и основные особенности наиболее актуальных методик диагностики:

1. При этом важно понимать, что неправильное использование тестов или несовершенное оборудование сильно снижают точность анализов.
2. Сначала идет скрининг — постановка быстрых тестов, основанных на методе иммунохроматографии.
3. В случае положительного результата, еще один анализ крови проверяется другой тест-системой.
4. Если вторая проба отрицательная, ставится третий анализ с третьей тест-системой.
5. Положительный третий результат — показание к дообследованию методом ИФА или иммуноблоттингом.
6. В ряде случаев для окончательной верификации диагноза применяют молекулярно-генетические методики.
7. По такому алгоритму предлагается выявлять инфицированных среди категории социально дезадаптированных лиц.
8. Так как для проведения быстрого теста требуется не более 30 минут.
9. Хотя правильнее все же обратиться в ближайший кожновенерологический диспансер и там пройти полное и максимально точное обследование.

• К такой рекомендации стоит прислушиваться.
• Потому что достаточно часто люди одновременно с ВИЧ заражаются хроническими вирусными гепатитами и другими инфекциями, передающимися половым путем.
• Из-за этого результаты быстрых тестов могут искажаться.
• Например, заметные сложности представляет сифилис.
• Трепонемная инфекция иногда приводит к ложноположительным срабатываниям иммуноферментных методов.

Лабораторная диагностика

1. Целью медиков является как можно более раннее выявление факта заражения.
2. К сожалению, возможностей обычной клинической лаборатории для этого недостаточно.
3. Так как требуется высокоточное и дорогостоящее оборудование, специально обученный персонал.
4. Такие лаборатории называются клинико-иммунологическими и оборудуются при крупных диагностических центрах или областных клинических больницах.
5. Алгоритм диагностики ВИЧ определяется тем, насколько полно оснащена лаборатория.

Без иммуноблота

• Сначала идет проведение стандартного анализа ИФА.
• При отрицательном результате человек считается здоровым.
• Но если недавно был риск заражения, например — интим с ВИЧ-инфицированным человеком, обследование необходимо повторить через 4-6 месяцев.
• Положительный ответ считается предварительным, и кровь берется еще раз.
• Повторное исследование проводится на тест-системе другого производителя.

С иммуноблотом

1. Все так же, как и в разделе выше.
2. Но при положительном результате первой ИФА, второй образец крови направляется на иммуноблот.
3. Этот анализ является основным и подтверждает или исключает факт заражения.

Молекулярно-генетические тесты

• На этапе диагностики их применяют достаточно редко, для уточнения наиболее спорных моментов.
• Например — когда необходимо срочно установить, здоров человек или заражен.
• Или когда клинические проявления свидетельствуют за ВИЧ/СПИД, а другие методики не дают ответа со 100% точностью.

Клиника

1. Распознать заражение по симптомам может только очень опытный врач.
2. И только тогда, когда заканчивается период бессимптомного носительства.
3. Даже несмотря на то, что на текущий момент, этиология, патогенез и эпидемиология инфекции достаточно хорошо изучены.
4. Инкубационный период составляет несколько дней или недель.
5. Затем следует фаза первичных проявлений.
6. Протекает она под маской ОРЗ (лихорадка, насморк, кашель) и поэтому остается не распознанной.
7. Длится несколько дней.
8. Любые лабораторные тесты в этом периоде также будут отрицательны.
9. Затем следует фаза вирусемии.
10. Она является чем-то похожей на сепсис.
11. Вирионы с током крови распространяются по всему организму и заражают все клетки, которые обладают особыми рецепторами (CD 4).

• Проникнув внутрь клетки, генетический материал ВИЧ встраивается в ее ядро и заставляет начать производство новых вирусных частиц.
• Клетка при этом погибает не сразу.
• Отсюда и берется такой длительный бессимптомный период, достигающий нескольких лет или даже десятилетий.
• Все современные тесты могут обнаружить факт заражения только спустя 2 или 3 месяца после инфицирования.
• Когда в крови накопится достаточное для анализа количество антител IgG.
• Исключение — ПЦР, которая нацелена на идентификацию генома возбудителей.
• Дальше, с началом стадии СПИД, человек начинает болеть разными инфекциями:

• Кандидоз
• Криптококкоз
• Пневмоциста
• Массивные герпетические атаки (опоясывающий лишай)
• Токсоплазмоз
• Туберкулез

1. У человека со здоровым иммунитетом такие заболевания очень большая редкость.
2. Поэтому их еще называют маркерами ВИЧ-инфекции.
3. Как правило, эти процессы и становятся причиной гибели больного СПИДом человека.
4. Поэтому диагностика и выявление факта заражения ВИЧ служит самым действенным методом профилактики СПИДа, так как больной может начать получать лечение.
5. Также, что немаловажно, от заражения уберегаются близкие люди, члены семьи и половые партнеры.
6. 

Методы диагностики

В верхней части статьи мы упоминали несколько методик, которыми пользуются вирусологические лаборатории для диагностики ВИЧ-инфекции.

Пришла пора познакомиться с ними поближе.

Иммуноферментный анализ

• Сокращенно — ИФА.
• Ранние варианты исследования допускали выявление только антител к ВИЧ.
• Однако на современном этапе есть возможность обнаруживать этим методом один из специфических антигенов вируса (белок p24).
• Основой для постановки классической реакции являются иммобилизованные (фиксированные к субстрату) на специальных пластиковых планшетах антигены ВИЧ.
• Как правило, это — многолуночные пластинки из инертного пластика, позволяющие проводить исследование сразу нескольких десятков образцов крови.

Этапы:

• Вскрытие планшета в стерильных условиях
• Нанесение в лунки по нескольку капель сыворотки крови из исследуемых проб
• Добавление проявляющих антител (синтезируются промышленным способом, входят в комплект тест-системы)
• Оценка результатов и установка диагноза

1. Теперь опишем суть.
2. На дне лунок находятся антигены вируса, которые синтезированы и зафиксированы там изготовителем системы.
3. Когда добавляют сыворотку в лунки, антитела IgG к ВИЧ (если они есть) связываются с этими антигенами и тоже фиксируются к субстрату.
4. Проявляющая сыворотка содержит в себе антитела к IgG.
5. Эти белки связаны со специальным ферментом с молекулой красителя.

Если в лунке содержатся IgG, то проявляющие антитела освобождаются от фермента и там появляется окраска. Факт реакции подтверждается спектрофотометром, образец считается таким, что содержит в себе антитела.

• Чувствительность метода колеблется между 93-100%.
• Специфичность достигает 99%, однако нельзя исключить ложных срабатываний на IgG к другим возбудителям.
• Поэтому верификация диагноза требует повторного проведения ИФА на другой тест системе или использования другого диагностического метода.

Иммуноблот

Другие названия — иммуноблоттинг, вестерн-блот, и в его основе тоже лежит метод ИФА.

Суть такова:

• Промышленным путем создаются пластинки из нитроцеллюлозы, на которые электрофорезом в разных местах нанесены 5 разных белков возбудителя СПИДа.
• На эти пластинки наносится исследуемая сыворотка.
• Если человек заражен, то антитела прикрепятся в нескольких метах пластинки.
• Визуализация результатов осуществляется добавлением проявляющих антител, как при ИФА.

Для того чтоб результат иммуноблоттинга считался положительным, должны появиться окрашенные полоски минимум в трех местах пластинки.

1. То есть должны быть выявлены антитела не менее чем к трем белкам ВИЧ.
2. В противном случае результат считается отрицательным или сомнительным.
3. Оценка реакции проводится специальным аппаратом на основе метода спектрофотометрии.
4. Поэтому человеческая субъективность при восприятии цвета на результаты теста не влияет.

Полимеразно-цепная реакция

Молекулярно-генетические методики вывели диагностику ВИЧ на качественно новый уровень.

С помощью ПЦР можно обнаружить инфекцию на тех этапах, при которых описанные выше серологические методы не информативны.

Т.е в самом начале процесса, когда антител еще нет.

И в продвинутой фазе, когда иммунная система поражена настолько, что антител уже нет.

Суть заключается в следующем:

• Из периферической крови выделяют лимфоциты — типичные клетки-мишени для ВИЧ.
• Экстрагируют нуклеиновые кислоты из клетки.
• Обрабатывают пробу специальными реагентами-праймерами, которые «настроены» на выявление уникального участка провирусной ДНК, отвечающего за синтез стержневого белка ВИЧ.

Если такая реакция состоялась, то праймер начинает синтезировать этот фрагмент, многократно дублируя его.

За счет этого достигается очень высокая чувствительность метода.

При правильном и качественном проведении ПЦР, можно обнаружить 1 провирусную ДНК на 100 тыс. лимфоцитов.

• Разработана модификация ПЦР, с помощью которой можно выявить истинную РНК вируса.
• Это позволяет оценивать вирусную нагрузку (количество вирионов в крови), эффективность антиретровирусной терапии и находить резистентные к препаратам АРТ формы вируса.
• Также только ПЦР подходит для дифференциальной диагностики между разными видами ВИЧ.

Быстрые тесты

1. Ни один из вышеперечисленных методов не подходит для массовой скрининговой диагностики.
2. В первую очередь — из-за высокой стоимости и необходимости в специальном дорогостоящем оборудовании.
3. Поэтому такую популярность получили тесты для экспресс-диагностики и, надо заметить — вполне заслуженную популярность.
4. Для их проведения не нужна высокотехнологичная техника и асептические условия: все помещается в один пакетик.
5. В нем есть тест-полоска с иммобилизованными антигенами, одноразовый скарификатор и буферный раствор с проявляющими антителами.
6. То есть перед нами очередной вариант хорошо изученной ИФА.
7. Прокалывается палец (нужна капиллярная кровь) и капля крови помещается в специальную лунку на полоске.

• Затем туда же капают буферный раствор.
• При положительном результате в окошке пластинки появляется поперечная полоска напротив специальной метки.
• За счет чего методика называет хроматографической.
• Чувствительность и специфичность метода сравнимы с иммуноферментным анализом.
• Однако для верификации диагноза положительные пробы должны подтверждаться в специализированной микробиологической лаборатории иммуноблоттиногом или классическим аппаратным ИФА.
• Без быстрых тестов не обойтись в ряде случаев:

• При обследовании больших количеств людей
• В случае необходимости в экстренном переливании крови
• Срочная трансплантация органов
• Тестирование беременных, уклонявшихся от женской консультации до родов

1. То есть тогда, когда необходимо получить действительно быстрый ответ.
2. Но для того, чтоб сделать заключение о наличии или отсутствии инфекции, нужно провести дифдиагностику вирусных инфекций.
3. Обязательно проводятся аппаратные лабораторные тесты.

Сроки

• Слабым местом всех точных способов диагностики является долгое (сравнительно) ожидание результата.
• Причина — высокая стоимость диагностического оборудования и расходных материалов.
• Из-за чего требуется полная загрузка аппарата.
• Так, если в лаборатории применяются планшеты на 96 лунок, то в работу образцы плазмы пойдут только тогда, когда медики насобирают 96 проб.
• Из-за этого ответ центра можно получить спустя 5-10 или 14 дней от момента сбора и доставки образца крови.
• А всего полноценное обследование с точным выводом об отсутствии инфекции потребует несколько месяцев.
• Причина в том, что на ранних этапах развития инфекции (в пределах 2-3 месяцев после момента заражения), антител к ВИЧ слишком мало.
• Этот период называется серологическим окном.
• Поэтому если произошла рискованная по заражению ситуация — секс с ВИЧ-инфицированным или авария при оказании медицинской помощи или любая другая беда — анализ сдают сразу.
• Если он отрицателен, то человеку назначают повторное обследование через какое-то время.
• Средний период составляет 4-6 месяцев, хотя могут быть изменения в обе стороны.
• Такие методические подходы диагностики и исключения ВИЧ применяются и в настоящее время.
• Предложены они были еще в далеком 1997г Всемирной организацией здравоохранения и объединенной программой ООН по борьбе с ВИЧ/СПИД.

Источник: http://www.venerologia.ru/venerologia/diagnostika-vich

Диагностика ВИЧ

Диагностика ВИЧ– одна из первостепенных задач, что стоят перед работниками кожно-венерологического диспансера, а также сотрудниками поликлиники.

Заболевание характеризуется врачами, как очень коварное. Характеризуется хроническим течением и не поддается полноценному лечению. Его важно своевременно выявлять, чтобы брать под контроль и предотвращать бесконтрольное распространение. В чем особенности вируса иммунодефицита человека, и как им можно заразиться, часто интересуются пациенты.

Какие есть способы диагностики болезни, и какие признаки позволяют заподозрить инфицирование?

Что это за вирус

Сегодня отовсюду можно услышать о том, насколько опасна ВИЧ-инфекция. Однако мало кто объясняет, в чем эта опасность заключается.

В результате пациенты обладают неполным набором информации и, как следствие, не воспринимают угрозу всерьез. А ведь ВИЧ отличается крайней опасностью.

Его относят к медленно прогрессирующим вирусным заболеваниям, склонным к хроническому течению. Поражается при этой патологии в первую очередь иммунная система.

Врачи обращают внимание пациентов на то, что смерть происходит не от самого вируса иммунодефицита, как такового.

Человек погибает от сопутствующих инфекций, обеспечить полноценную защиту от которых организм уже не способен. Также причиной гибели становятся раковые опухоли, с которыми оказывается не в состоянии бороться сниженный иммунитет.

На самом деле механизм воздействия ВИЧ-инфекции на иммунную систему довольно сложен. Как отмечают доктора, пациентам вовсе не обязательно понимать его досконально. Достаточно знать, что заболевание способно снижать уровень иммунитета до критических значений. В результате организм окажется неспособен защищаться от различных воздействий извне, что приведет к гибели рано или поздно.

Как происходит заражение

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция сегодня окружена большим количеством самых разнообразных мифов.

Пациенты очень плохо информированы о том, в каких случаях можно заразиться, а когда здоровье находится вне опасности.

Первое, что необходимо запомнить, это то, что ВИЧ отличается очень сильной неустойчивостью в окружающей среде. Это значит, что патогенный микроорганизм способен полноценно и длительно жить только в человеческом теле.

Он не переносит нагревания свыше 50 градусов (умирает мгновенно). Также не способен противостоять процессам высыхания.

Далеко не все жидкости организма содержат достаточное количество вируса для того, чтобы произошло заражение.

Наибольшую опасность представляют:

• кровь;
• предэякулят;
• сперма;
• выделения из женского влагалища;
• лимфа;
• грудное молоко.

Если любая из этих жидкостей контактирует со слизистыми оболочками, в которых есть микротравмы, или с пораженной травмами кожей, происходит заражение.

Также оно возможно в том случае, если инородная жидкость попадает напрямую в кровоток. Слюна и слезы, вопреки распространенному мнению, угрозы не представляют. Из-за особенностей вируса и его низкой выживаемости передается он несколькими способами:

• половой путь т.е. при незащищенных половых контактах, которые неминуемо влекут за собой соприкосновение биологических жидкостей и восприимчивых к патогену слизистых оболочек организма;
• парентеральный путь т.е. перенос вируса с кровью при ее переливании или из-за использования нестерильного инструментария в медицинских целях;
• вертикальный путь т.е. от матери к ребенку (сегодня если женщина принимает антиретровирусную терапию и отказывается от кормления грудью, вероятность заражения ребенка в родах сводится к минимуму).

Важно понимать, что если для заражения через кожу микротравмы или открытые раны обязательны, то для заражения через слизистую это не обязательно условие. Объясняется разница тем, что слизистые оболочки и кожные покровы человеческого организма имеют совершенно разное строение. Эту разницу необходимо учитывать.

По каким признакам заподозрить ВИЧ

Многие пациенты интересуются вопросом о том, по каким признакам обычно можно заподозрить заражение вирусом иммунодефицита человека.

Врачи рекомендуют обращаться для диагностики в СПИД-центры или поликлиники по месту жительства, если человек замечает у себя следующие симптомы:

• необоснованное повышение температуры системного типа, которое нельзя объяснить какой-либо другой инфекцией, и которое сохраняется в течение длительного времени, несмотря на предпринимаемые для лечения меры;
• сильное увеличение лимфатических узлов в размерах (в первую очередь страдают узлы в области паха, но возможно и их вовлечение во всем организме);

Читать также Урогенитальный соскоб

• сильное снижение массы тела, которое нельзя объяснить диетами, стрессами, гормональными сбоями и другими причинами;
• жалобы на расстройства стула, которые преследуют пациента в течение длительного времени, а найти причину, по которой они появились, не удается;
• выраженная склонность к переходу любых инфекционных заболеваний в хронические формы, причем природа возбудителя особого значения не имеет, хронизируются как бактериальные, так и вирусные патологии;
• развиваются заболевания, провоцируемые условно-патогенной микрофлорой, которая не представляет угрозы для человека, чей иммунитет работает в полной мере (например, микоплазмоз, уреаплазмоз, кандидоз и др.).

Клиника ВИЧ-инфекции очень неспецифична, как отмечают доктора. Из-за этого часто возникают трудности с постановкой диагноза. Многие пациенты вовсе игнорируют тревожные симптомы, предпочитая не обращаться за врачебной помощью. Даже в том случае, если заболевание сильно сказывается на их общем самочувствии.

Важно понимать, что ВИЧ-инфекция в течение длительного времени может вообще не давать о себе знать. А когда первые признаки появятся, человек может даже не связать их с возможностью своего заражения и делать попытки лечиться в домашних условиях.

Способы диагностики

Лабораторная диагностика ВИЧ разработана довольно давно и с успехом применяется для того, чтобы диагностировать это опасное заболевание.

Недуг нельзя опознать только по симптомам. Поэтому подтверждение диагноза на основании лабораторных методик часто играет решающую роль.

Существуют различные методы диагностики ВИЧ. В России в первую очередь предпочтение отдается иммунному блоттингу, а также ИФА-реакциям. Эти способы используются часто в качестве скрининговых, например, при проверке медицинского персонала.

ИФА-системы

Часто пациенты спрашивают у своих врачей, с какого способа стоит начать диагностический поиск при подозрении на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Любой грамотный доктор скажет, что предпочтение стоит отдать иммуноферментному анализу. Именно эта методика на территории России является первым диагностическим этапом.

Принцип работы ИФА прост. В лаборатории врачами были созданы специальные белки. Они способны обнаруживать антитела, вырабатываемые организмом в ответ на контакт с ВИЧ, и взаимодействовать с ними. Затем к системе добавляют специальный фермент-индикатор, который изменяет свой цвет. На конечном этапе материал обрабатывается с помощью специального аппарата, и врач получает итоговый результат.

ИФА пользуется большой популярностью.

Прежде всего из-за того, что получить результаты можно даже в том случае, если с момента внедрения патогенна в организм прошло не более нескольких недель.

Важно понимать, что иммуноферментный анализ определяет не сам вирус в крови, а антитела к нему.

У многих людей они могут начать вырабатываться позже, чем через две недели, из-за чего результат может быть ошибочным. Существует несколько поколений ИФА-тестов.

Самыми современными и высокоточными считаются те, что относятся к 3 и 4 поколениям. Врачи отмечают, что лучше всего, если есть выбор, отдавать предпочтение Европейским реагентам, так как их точность достигает 99%. Сроки получения результатов ИФА составляют в среднем от 2 до 10 дней.

Почему ИФА может быть ложной

Важно понимать, что иммуноферментный анализ может давать как ложноположительные, так и ложноотрицательные результаты. Хотя риск подобного развития событий крайне мал.

Ложноотрицательные результаты пациент может получить в том случае, если анализ был сдан слишком рано, и антитела еще не успели образоваться в организме.

Чтобы исключить подобную реакцию, пациентам рекомендуется сдавать анализ несколько раз с различным промежутком времени.

Ложноположительный тест встречается при некоторых заболеваниях. Например, получить положительные результаты могут пациенты с:

• алкогольным гепатитом;
• миеломами в большом количестве;
• некоторыми аутоиммунными болезнями;
• женщины в период беременности и др.

При подобных заболеваниях кровь человека пополняется антителами. Они могут напоминать по структуре антитела к ВИЧ, что вводит реагенты в замешательство, провоцируя реакцию. Конечно, в последние годы тестовые системы становятся все более и более чувствительными. Однако пока до конца решить проблему ложных результатов не удалось.

Иммуноблоттинг

В современных условиях поставить положительный диагноз ВИЧ, опираясь только на ИФА, нельзя. Необходимо подтверждение полученных результатов, которое выполняется с помощью реакции иммунного блоттинга (иммуноблоттинг, ИБ).

Чтобы выполнить ИБ, в лаборатории должны присутствовать специальные тестовые полоски. На них наносятся вирусные белки. Перед тем, как проводить анализ, кровь пациента, взятую из вены, подготавливают специальным образом.

Читать также Мазок после лечения

Полученный биологический материал добавляют в гель, в котором происходит разделение белков по их весу. Затем в полученную массу опускают предварительно заготовленную полосу.

Полоса намокает (происходит блоттинг), на ней выявляются полосы, если в материале есть белки ВИЧ-инфекции. Если белки отсутствуют, намокание не изменяет внешний вид полосы.

Существует несколько трактовок иммуноблоттинга. Однако по какому бы способу конкретная больница или лаборатория не выполняла расшифровку, вероятность правильности постановки диагноза составляет 99,9%.

Может ли иммуноблоттинг давать неверные результаты, часто интересуются пациенты? Да, это возможно, например, если пациент болен туберкулезом, находится в состоянии беременности, страдает от онкологии.

Врачам, назначающим иммуноблоттинг, рекомендуется учитывать ассоциированные состояния, которые могут дать ложноположительные результаты.

Пцр в помощь

ПЦР – еще один метод, который может диагностировать вирус иммунодефицита человека в крови и других биологических жидкостях, где его концентрация достаточно высока.

Как отмечают доктора, полимеразная цепная реакция может дать положительный результат уже через 10 дней после того, как произошел первый контакт организма с инфекцией.

Важно понимать, что ПЦР в ряде случаев дает ложноположительные результаты. Объясняется это тем, что метод обладает очень высокой чувствительностью.

В результате нередко он реагирует на похожие антитела, свидетельствующие о совсем других патологических процессах в организме пациента.

Несмотря на высокую чувствительность и невысокую вероятность получения ложных результатов, ПЦР не используется повсеместно. Объясняется это несколькими факторами.

Во-первых, для выполнения полимеразной цепной реакции требуется специальное оборудование, цена на которое довольно велика. Во-вторых, персонал, работающий с оборудованием, должен обладать высокой квалификацией, что тоже может вызывать затруднения.

Эти особенности в комплексе делают ПЦР дорогим методом диагностики и, как следствие, доступным далеко не всем.

Несмотря на то, что ПЦР не является скрининговым методом, его применяют, например, для проверки новорожденного на заражение вирусом иммунодефицита человека.

Экспресс-системы для диагностики

Врачи и ученые потратили множество усилий на то, чтобы создать экспресс-тесты для оценки зараженности ВИЧ-инфекцией. Как отмечают доктора, при использовании этих систем есть возможность получить результат уже через 15 минут после того, как тест был проведен.

Экспресс-тесты на ВИЧ строятся на принципе иммунохроматографии. В систему обычно входит полоска, пропитанная специальными реагентами.

Задача пациента состоит в том, чтобы нанести на нее кровь, сперму или любую другую биологическую жидкость, в которой могут содержаться антитела к вирусу.

Если они обнаружатся, то на полоске появятся две цветные полосы, одна из которых контрольная, а другая диагностическая. Если не обнаружатся, то выявится только контрольная полоса.

Важно понимать, что экспресс-тесты не дают 100% гарантии того, что человек не заражен или, напротив, заражен ВИЧ-инфекцией. В любом случае результаты, полученные с их помощью, необходимо подтверждать в лаборатории с помощью иммуноблоттинга.

Тест-системы экспресс типа удобны пациентам, которые хотят в домашних условиях успокоить себя. Однако, как отмечают доктора, даже если с их помощью человек получил отрицательный результат, при подозрениях на негативные изменения в организме все же стоит обратиться к врачу.

К какому врачу обратиться при подозрении на заражение

Многие пациенты задаются вопросом о том, к какому врачу им обращаться в том случае, если есть подозрение на заражение ВИЧ-инфекцией. В первую очередь рекомендуется посетить врача венеролога. Именно этот медицинский работник специализируются на заболеваниях, которые способны передаваться от человека к человеку половым путем.

Венеролог сможет провести грамотный осмотр, собрать анамнез и принять решение о том, какие обследования необходимы пациенту для точной постановки диагноза. По своему усмотрению он также может направить пациента в инфекционную больницу. Особенно в том случае, если все же подозревает у него ВИЧ.

Вирус иммунодефицита человека – распространенное заболевание. Столкнуться с ним может любой человек, ведущий активную половую жизнь.

Знание особенностей распространения и диагностики этой болезни в современных реалиях является жизненно-необходимым, если пациент хочет сохранить свое здоровье и долголетие. Только своевременное обращение к доктору позволит взять инфекцию под контроль и защититься от нее!

Источник: http://intimnyjotvet.ru/diagnostika/diagnostika-vich.html

Диагностика ВИЧ: методы и исследования

Ранняя диагностика заболеваний – залог успешного лечения. Ставшее крылатым выражение, особенно актуально для ВИЧ-инфекции. Ведь заболевание неизлечимо полностью, и только своевременная диагностика позволяет взять течение болезни под контроль и выбрать тактику лечения, чтобы жить полноценной жизнью.

Ранний срок диагностики ВИЧ – со 2 недели от предположительного заражения.

Важность клинической диагностики ВИЧ

В понимании многих людей ВИЧ-инфицированный человек выглядит болезненно, изнеможенно. Он кашляет, чихает, чешется, стонет, у него все болит… На самом деле это не так! Проблема в том, что после инфицирования ВИЧ и в последующий инкубационный период симптомы полностью отсутствуют.

Затем наступает острая фаза, на протяжении которой присутствуют симптомы, напоминающие ОРВИ или грипп. Но и они вскоре проходят, и наступает, так называемый, латентный период – продолжительный промежуток времени, когда ВИЧ-инфекция себя ничем не выдает.

С момента инфицирования и до стадии пред-СПИДа может пройти порядка 10 лет, в течение которых, ни сам пациент, ни его окружение, даже и не подозревают о болезни. А когда она уже на полную мощность заявляет о себе, контролировать ее очень трудно.

Сложно противостоять осложнениям ВИЧ, поддерживать практически разрушенную иммунную систему человека.

Очень важно понимать, что, хотя и есть группы риска – гомосексуалисты, наркозависимые и девушки легкого поведения – в основной массе, пациенты с ВИЧ-инфекцией – это обычные люди.

Они учатся, ходят на работу, посещают общественные места, знакомятся в интернете – в общем, живут как все. К сожалению, но от ВИЧ никто не застрахован.

Незащищенный половой контакт в порыве страсти, заветное тату без соблюдения стерильности, маникюр за полцены у начинающего мастера, уличная драка – все эти и множество других житейских ситуаций могут обернуться инфицированием ВИЧ.

Не ошибается лишь тот, кто не живет! Мы не можем знать все наперед, не можем исправить уже совершенных ошибок, но мы можем предпринять простые шаги для исправления их последствий – обратиться в ближайший кожно-венерологический диспансер, в местную клинику или специализированный СПИД-центр для сдачи анализов и ранней диагностики ВИЧ.

Благоприятные сроки для диагностики ВИЧ

Факт возможного инфицирования и плохое самочувствие без видимых причин – два веских основания для обращения к специалистам.

Но отрицательный результат тестирования на антитела не всегда означает, что человек не инфицирован, так как существует период “серонегативного окна” (время между заражением и появлением антител), который составляет около трех месяцев. Поэтому лучше повторить их спустя 3 месяца с момента возможного инфицирования.

Если же ответ опять будет отрицательным, но ваша тревога не проходит, и вы уверены в заражении ВИЧ, тогда лабораторную диагностику необходимо повторить спустя 6 месяцев после факта заражения.

Что касается плохого самочувствия, то поводом провериться на ВИЧ может быть сочетание следующих симптомов:

• увеличение лимфатических узлов на шее, в паху, в области подмышек;
• лихорадка;
• мышечные или головные боли;
• молочница и грибковые поражения, в том числе кандидоз полости рта;
• воспаление слизистой носа, рта или глотки;
• ночная потливость;
• ломота в суставах;
• длительная диарея;
• тошнота, рвота;
• резкое снижение массы тела;
• высыпания на коже.

Важно понимать, что с момента, когда проявляются первые признаки ВИЧ-инфекции и до момента, когда заболевание переходит в латентную стадию, проходит очень мало времени – около 3-6 недель с факта инфицирования.

Нельзя упускать из вида этот промежуток времени! Поскольку последующие 8-10 лет вы будет жить, нормально себя чувствовать и даже не подозревать о том, что больны ВИЧ-инфекцией. Драгоценное время будет упущено.

Современные методы диагностики ВИЧ

В настоящее время в диагностике ВИЧ используется двухуровневый подход – косвенные и прямые тесты. Косвенные тесты позволяют обнаружить в крови пациента специфические антитела к ВИЧ, а прямые тесты помогают выявить собственно сам ВИЧ и определить степень вирусной нагрузки на организм. В России стандартная диагностика ВИЧ включает следующие методы лабораторных исследований:

• ИФА (иммуноферментный анализ).
• Иммуноблот (иммунный блоттинг).

Также могут быть применены следующие методики:

• Экспресс-тест ИХА (иммунохроматография).
• ПЦР (полимеразная цепная реакция).

Диагностические принципы лабораторных исследований и степень их достоверности приведены в нижеследующей таблице.

При проведении исследований важно использовать сверхточное оборудование и верно интерпретировать результаты анализов. В противном случае точность диагностики снижается. При этом специалисты считают, что рациональнее всего проводить исследования в следующей последовательности.

1. Сначала экспресс-диагностика, основанная на методе ИХА.
2. В случае положительного результата – еще один анализ крови по методу ИФА.
3. Положительный второй результат – проводится дообследование методом ИФА или иммуноблоттингом.
4. В исключительных случаях для окончательной постановки диагноза можно применить более сложный и дорогостоящий метод ПЦР.

Экспресс-тесты методом ИХА или скрининг ИФА, предполагающий серологическое иммуноферментное исследование крови, выполняются в течение 15-30 минут. Высокая скорость диагностики актуальна в неотложных случаях, при планировании срочных операций.

Но для постановки окончательного диагноза необходимо использовать основной метод диагностики – иммунный блоттинг. Если результаты ИФА и иммунного блоттинга противоречат друг другу, то возможно проведение референс диагностики – анализ сразу двумя методами. К проведению ПЦР прибегают в исключительных случаях, т.к.

это наиболее дорогостоящий метод исследования. Далее разберем каждый из методов диагностики более подробно.

Экспресс-тест ИХА

Иммунохроматографические тесты неплохо зарекомендовали себя в экспресс-диагностике ВИЧ. Визуально они выглядят как полоски, на поверхность которых наносят исследуемый биологический материал (кровь, слюна).

Для получения результата потребуется всего 10-15 минут, по истечении которых на тесте проявится, или цветная и контрольная полоска – положительный результат, подтверждающий наличие антител к ВИЧ, или только контрольная полоска – отрицательный результат.

С недавнего времени американская компания OraSure Technologies наладила массовое производство экспресс-тестов для домашнего применения. Они отпускаются без рецепта, и при желании их может использовать каждый желающий. Однако необходимо учесть, что по точности диагностики ИХА уступает методу ИФА, а для постановки окончательного диагноза необходимо проведение иммуноблота.

Скрининговый тест ИФА

Принцип метода основан на способности искусственно созданных белков ВИЧ, улавливать вырабатывающиеся в организме человека специфические антитела. В результате взаимодействия, тест-система ИФА изменяет окрас индикатора. Полученные изменения цвета обрабатываются с помощью аппаратуры, которая выдает результат анализа.

При этом необходимо учесть, что скрининговый тест предназначен для выявления не ВИЧ как такового, а антител к нему. А поскольку для их появления в организме, необходимо время, то целесообразнее всего проводить скрининг спустя 3-6 недель после факта возможного инфицирования. Для этого достаточно всего 5 мл крови из вены пациента, забор которой проводят натощак, т.е.

спустя 7-8 часов после последнего приема пищи.

Помимо положительного или отрицательного результата, тест ИФА может дать ложноположительный или ложноотрицательный результат.

• Ложноположительный – речь может идти об сходных по своей структуре антителах, которые вырабатываются в организме при аутоиммунных заболеваниях, множественных миеломах, алкогольном гепатите и других патологиях.
• Ложноотрицательный – скорее всего, тестирование было проведено преждевременно или иммунная система слишком слаба и не вырабатывает антитела к ВИЧ.

При сомнительном результате тест проводится повторно.

Иммунный блоттинг

Иммуноблот – это основной метод диагностики ВИЧ, сочетающий иммуноферментный анализ (ИФА) с предварительным электрофоретическим переносом на нитроцеллюлозную полоску антигенов вируса. Для их выявления анализ проводят в три этапа:

• подготовка нитроцеллюлозной полоски;
• исследование пробы биологического материала пациента;
• трактовка результата.

Таким образом, в ходе проводимого исследования, основные белки ВИЧ распределяются по поверхности в виде отдельных полос, которые проявляются при проведении иммуноферментной реакции и подтверждают наличие или отсутствие антител к антигенам ВИЧ. Полученные в ходе исследования иммунным блоттингом результаты считаются окончательными.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Главное отличие ПЦР от других методов диагностики – тест-система определяет ДНК вируса. С ее помощью можно выявить даже единичные вирусные частицы. Применение метода возможно уже на 5ый день после факта возможного инфицирования с точностью до 80%, что позволяет провести раннюю диагностику ВИЧ. Однако ПРЦ проводят только в исключительных случаях.

• для постановки диагноза новорожденным, появившимся на свет от ВИЧ-инфицированных матерей;
• при сомнительных результатах иммуноблота;
• для оперативного исследования донорской крови;
• для оценки уровня ВИЧ в крови инфицированного пациента.

Несмотря на высокую чувствительность метода ПЦР, он обладает меньшей диагностической чувствительностью к ВИЧ, что объясняется вариабельностью генома вируса. Поэтому для постановки окончательного диагноза данный метод не используется.

Новые и альтернативные методы диагностики ВИЧ

Недавно, сотрудниками Питтсбургского университета был разработан новый высокочувствительный тест для обнаружения скрытых вирусов – тест TZA. Для его проведения требуется меньше времени и крови пациента.

Принцип действия TZA сводится к поиску гена, который активируется только при репликации вируса.

Несмотря на то, что разработчики уверены в эффективности теста, большинство специалистов склоняется к тому, что TZA не сможет заменить существующие методы диагностики полностью, поскольку он характеризуется иным механизмом действия и не подходит абсолютно каждому ВИЧ-инфицированному пациенту.

Где и как можно пройти диагностику ВИЧ

Сегодня тест на ВИЧ-инфекцию не является проблемой. При желании пациента, кровь на анализ можно сдать анонимно и абсолютно бесплатно.

Сделать это можно в медицинских организациях по месту жительства, в Свердловском областном центре профилактике и борьбы со СПИД (г. Екатеринбург, ул. Ясная, 46.

Регистратура: (343) 383-30-18 Телефон доверия по проблеме ВИЧ/СПИД: (343) 310-00-31 (будни, с 9 до 20 часов).

Диагностика ВИЧ – дело сугубо добровольное. Однако есть четыре ситуации, для которых прохождение теста является обязательным:

1. Донорство.
2. Трудоустройство на работу, предполагающую непосредственный контакт с биоматериалом, который может содержать ВИЧ.
3. Иностранные граждане.

Лица при призыве на военную службу, поступающие в военные учебные заведения.

Но и в этих случаях тестирование не может проводиться насильно, поскольку для любого медицинского вмешательства необходимо добровольное и осознанное согласие пациента. Именно осознанное, поскольку каждый из нас должен понимать важность своевременной диагностики ВИЧ.

Источник: http://profilaktica.ru/profilaktika-zabolevaniy/vich-infektsiya/profilaktika-vich-infektsii/diagnostika-vich-metody-i-issledovaniya/

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Своевременная диагностика ВИЧ-инфекции становится крайне важной мерой, т. к. ранее начало лечения может во многом предопределить дальнейшее развитие заболевания и продлить жизнь больного СПИДом.

В последние годы наблюдается весомый прогресс в области выявления этой страшной болезни: на смену старым тест-системам приходят более совершенные, методы обследования становятся более доступными, и их точность значительно повышается.

В данной статье расскажем о современных методах диагностики ВИЧ-инфекции, знать которые полезно для своевременного лечения данной проблемы и поддержания нормального качества жизни заболевшего.

Методики диагностики ВИЧ

В России для диагностики ВИЧ-инфекции проводится стандартная процедура, включающая в себя два уровня:

• ИФА тест- система (скрининговый анализ);
• иммунный блоттинг (ИБ).

Также для диагностики могут применяться другие методики:

Ифа тест-системы

На первом этапе диагностики для выявления ВИЧ-инфекции применяется скрининговый тест (ИФА), который основан на созданных в лабораториях белках ВИЧ, улавливающих вырабатывающиеся в организме в ответ на инфицирование специфические антитела. После их взаимодействия с реагентами (ферментами) тест-системы изменяется окраска индикатора. Далее эти изменения цвета обрабатываются на специальной аппаратуре, которая и определяет результат выполненного анализа.

Такие ИФА-тесты способны показывать результат уже через несколько недель после внедрения ВИЧ-инфекции. Этот анализ определяет не наличие вируса, а выявляет выработку антител к нему. Иногда, в организме человека выработка антител к ВИЧ начинается через 2 недели поле заражения, но у большинства людей они вырабатываются на более поздних сроках, спустя 3-6 недель.

Существует четыре поколения ИФА-тестов с различной чувствительностью. В последние годы чаще применяются тест-системы III и IV поколения, которые созданы на основе синтетических пептидов или рекомбинантных белков и обладают большей специфичностью и точностью.

Они могут использоваться для диагностики ВИЧ-инфекции, мониторинга распространенности ВИЧ и обеспечения безопасности при проверке донорской крови.

Точность ИФА-тест-систем III и IV поколения составляет 93-99% (более чувствительны тесты, которые выпускаются в странах западной Европы – 99%).

Для выполнения ИФА-теста проводится забор 5 мл крови из вены пациента. Между последним приемом пищи и анализом должно пройти не менее 8 часов (как правило, он выполняется утром натощак). Такой тест рекомендуется сдавать не ранее, чем через 3 недели после предполагаемого заражения (например, после незащищенного полового акта с новым половым партнером).

Результаты ИФА-теста получаются через 2-10 дней:

• отрицательный результат: указывает на отсутствие инфицирования ВИЧ и не требует обращения к специалисту;
• ложноотрицательный результат: может наблюдаться на ранних сроках инфицирования (до 3 недель), при поздних стадиях СПИДа при выраженном подавлении иммунитета и при неправильно проведенной подготовке крови;
• ложноположительный результат: может наблюдаться при некоторых заболеваниях и при неправильно проведенной подготовке крови;
• положительный результат: указывает на заражение ВИЧ инфекцией, требует проведения ИБ и обращения пациента к специалисту в центр СПИДа.

Почему ИФА-тест может давать ложноположительные результаты?

Ложноположительные результаты ИФА-теста на ВИЧ могут наблюдаться при неправильной обработке крови или у больных с такими состояниями и заболеваниями:

• множественная миелома;
• алкогольный гепатит;
• инфекционные заболевания, спровоцированные вирусом Эпштейна-Барр;
• состояние после диализа;
• аутоиммунные заболевания;
• на фоне беременности;
• состояние после вакцинации.

При вышеописанных причинах в крови могут присутствовать неспецифические перекрестно реагирующие антитела, выработка которых была спровоцирована не ВИЧ-инфекцией.

В последние годы частота ложноположительных результатов существенно снизилась благодаря применению тест-систем III и IV поколения, которые содержат более чувствительные пептидные и рекомбинантные белки (они синтезируются при помощи генной инженерии in vitro"). После начала применения таких ИФА-тестов частота ложноположительных результатов значительно снизилась и составляет около 0,02-0,5%.

Выявление ложноположительного результата не означает, что человек инфицирован ВИЧ. В таких случаях ВОЗ рекомендует провести еще один ИФА-тест (обязательно IV поколения).

Кровь пациента отправляется в референс или арбитражную лабораторию с пометкой «повторить» и исследуется на ИФА тест-системе IV поколения.

Если результат нового анализа отрицательный, то первый результат признается ошибочным (ложноположительным) и ИБ не проводится.

При положительном или сомнительном результате во время второго теста больному обязательно назначается проведение ИБ через 4-6 недель для подтверждения или опровержения ВИЧ-инфицирования.

Иммунный блоттинг

Окончательный диагноз инфицирования ВИЧ может устанавливаться только после получения положительного результата иммунного блоттинга (ИБ). Для его проведения применяется нитроцеллюлозная полоска, на которую нанесены вирусные белки.

Забор крови для ИБ выполняется из вены. Далее она подвергается специальной обработке и содержащиеся в ее сыворотке белки разделяют в специальном геле по их заряду и молекулярной массе (манипуляция проводится на специальной аппаратуре под воздействием электрического поля).

На гель из сыворотки крови накладывают нитроцеллюлозную полоску и проводят блоттинг («промакивание») в специальной камере. Полоска обрабатывается и если в используемых материалах есть антитела к ВИЧ, то они связываются с антигенными полосами на ИБ и проявляются в виде линий.

ИБ считается положительным если:

• по критериям American CDC – на полоске есть две или три линии gp41, p24, gp120/gp160;
• по критериям American FDA – на полоске есть две линии р24, р31 и линия gр41 или gр120/gр160.

• В 99,9% случаев положительный результат ИБ указывает на ВИЧ-инфицирование.
• При отсутствии линий – ИБ является отрицательным.
• При выявлении линий с gр160, gр120 и gр41- ИБ является сомнительным. Такой результат может выявляться при:

В таких случаях рекомендуется выполнение повторного исследования при помощи набора другой фирмы. Если же после дополнительного ИБ результат остается сомнительным, то необходимо наблюдение в течение полугода (через каждые 3 месяца проводятся ИБ).

Полимеразная цепная реакция

Тест на ПЦР может определять РНК вируса. Его чувствительность достаточно высока и он позволяет выявлять ВИЧ-инфицирование уже через 10 дней после заражения. В некоторых случаях ПЦР может давать ложноположительные результаты, т. к. его высокая чувствительность может реагировать и на антитела к другим инфекциям.

Данная методика диагностики является дорогостоящей, требует специального оборудования и высокой квалификации специалистов. Эти причины не дают возможности проводить ее при массовом тестировании населения.

ПЦР применяется в таких случаях:

• для выявления ВИЧ у новорожденных, которые родились от ВИЧ-инфицированных матерей;
• для выявления ВИЧ в «периоде окна» или при сомнительном ИБ;
• для контроля концентрации ВИЧ в крови;
• для исследования донорской крови.

Только по тесту ПЦР диагноз ВИЧ не ставится, а проводится в качестве дополнительного метода диагностики для разрешения спорных ситуаций.

Экспресс-методы

Одной из инноваций в диагностике ВИЧ стали экспресс-тесты, результаты которых могут оцениваться уже через 10-15 минут. Наиболее эффективные и точные результаты получаются при помощи иммунохроматографических тестах, основанных на принципе капиллярного потока.

Они представляют собой специальные полоски, на которые наносится кровь или другие исследуемые жидкости (слюна, моча). При наличии антител к ВИЧ спустя 10-15 минут на тесте появляются цветная и контрольная полоска – положительный результат.

При отрицательном результате – появляется только контрольная полоска.

Как и после тестов ИФА, результаты экспресс-тестов должны подтверждаться анализом ИБ. Только после этого может ставиться диагноз о ВИЧ-инфицировании.

Существуют экспресс-наборы для домашнего тестирования. Тест OraSure Technologies1 (США) одобрен FDA, продается без рецепта и может применяться для выявления ВИЧ. После проведения теста, в случае положительного результата, больному рекомендуется пройти обследование в специализированном центре для подтверждения диагноза.

Остальные тесты для домашнего использования еще не были одобрены FDA и их результат может быть очень сомнительным.

Несмотря на то, что экспресс-тесты по своей точности уступают ИФА-тестам IV поколения, они широко применяются для дополнительного тестирования населения.

Сдать анализы на выявление ВИЧ-инфекции можно в любой поликлинике, ЦРБ или в специализированных СПИД-центрах. На территории России они проводятся абсолютно конфиденциально, или анонимно.

Каждый пациент может рассчитывать на получение медицинской или психологической консультации до или после проведения анализа.

Платить за тесты на ВИЧ придется только в коммерческих лечебных учреждениях, а в государственных поликлиниках и больницах они выполняются бесплатно.

О том, какими путями можно заразиться ВИЧ-инфекцией и какие мифы существуют о возможностях заразиться, читайте в этой статье.

К какому врачу обратиться

Чтобы обследоваться на ВИЧ-инфекцию, нужно посетить терапевта и взять у него направление на анализ. Кроме того, можно прийти непосредственно в Центр профилактики и борьбы со СПИДом и сдать анализы там анонимно. Направляет на это обследование и врач-инфекционист или венеролог при подозрении на ВИЧ-инфекцию.

Источник: https://myfamilydoctor.ru/sovremennye-metody-diagnostiki-vich-infekcii/