Пцр у женщин – зачем нужен анализ и когда сдается.

Диагностика инфекционных заболеваний разного типа – как вирусных, так и бактериальных – направлена на выявление возбудителей на ранней стадии, что даёт возможность назначить своевременное и особенно эффективное лечение. Самым современным методом обнаружения инфекций является ПЦР, который расшифровывается как полимеразная цепная реакция. В чём суть данного метода и с какой целью он проводится?

Сущность полимеразной реакции

В структуре любого вируса и микроорганизма содержатся молекулы РНК или ДНК. Характерно, что у каждого данные соединения являются уникальными, в связи с чем, выделяя в анализе крови у взрослых или у детей нуклеиновые кислоты, можно поставить диагноз с абсолютной точностью.

К несчастью, концентрация ДНК как в образцах крови, так и в иных биологических материалах, довольно низкая, поэтому посредством обыкновенных диагностических методов её не получается определить. Для того чтобы справиться с данной проблемой, в своё время изобрели цепную полимеразную реакцию.

Итак, сущность данного анализа заключается в специфической обработке кровяного образца, благодаря которой в ней повышается концентрация молекул ДНК, и установление их типа в дальнейшем даёт возможность выявить вид возбудителя, а также поставить верный диагноз.

Как проводится анализ крови на ПЦР

Метод ПЦР осуществляется только в лабораторных условиях. Чтобы его провести, используются особые ферменты, увеличивающие структуру РНК и ДНК пациента в несколько раз.

При этом должно сформироваться такое их количество, чтобы стало возможным проведение визуального исследования.

В течение обследования осуществляется копирование такого участка, который подходит под требуемые условия по всем параметрам. Что такое анализ крови ПЦР на РНК, интересно многим.

В лаборатории имеется в наличии необходимая база данных, где указывается точная структура разнообразных инфекционных агентов. Использование метода ПЦР позволяет не просто установить вид возбудителя, но и высчитать его количественную пропорцию.

• ПЦР-диагностика включает в себя также и некоторые новшества, в числе которых выделяются следующие:
• — соединение различных фрагментов ДНК;
• — введение мутации;

— установление отцовства и т. п.

Какие заболевания выявляются благодаря ПЦР?

Благодаря ПЦР возможно выявление практически всех бактериальных и вирусных патологий.

Для исследования может использоваться не только кровь, но и иные биологические материалы, такие как мазки из уретры и из маточной шейки, слюна, сперма.

Анализ становится достаточно информативным тогда, когда возбудитель определённого заболевания попадает в кровь человека. Именно поэтому анализ крови на ПЦР назначается при следующих патологиях:

1. — вирусные гепатиты типа А, В, С, D и TT;
2. — инфекция герпетического характера (то есть вирусы первого, второго и четвёртого типов);
3. — цитомегаловирус;
4. — энтеровирусная инфекция;

• — ВИЧ-инфекция;
• — краснуха;
• — листериоз;
• — опоясывающий лишай;
• — инфекционный мононуклеоз;
• — токсоплазмоз.
• Если принять во внимание осуществление ПЦР с помощью иных биоматериалов, то в перечень патологий, которые можно выявить благодаря данному способу, нужно добавить следующие:
• — сальмонеллез;
• — дифтерия;
• — гарднереллез;
• — микоплазмоз;
• — туберкулез;
• — трихомониаз;
• — папилломавирусную инфекцию (около ста разнообразных штаммов вируса человеческой папилломы).

Особую актуальность приобрёл в настоящее время ПЦР-анализ крови в период беременности на TORCH-инфекции, к которым относятся токсоплазмоз, цитомегаловирус, герпесвирусная инфекция и краснуха. Это связано с тем, что вышеперечисленные заболевания способны вызвать отклонения в развитии плода.

Плюсы ПЦР

В чём же заключаются преимущества данного метода?

• Стопроцентная точность диагностики: при наличии в крови хотя бы нескольких ДНК-фрагментов возбудителя они будут определены реакцией ПЦР, а значит, будет поставлен правильный диагноз. Именно в этом заключается основное отличие подобного метода от иных способов диагностики – общего анализа крови, ИФА и других.
• Специфичность. Во время осуществления анализа крови ПЦР на боррелиоз, например,нет такого понятия, как ложноотрицательный или ложноположительный результат, что отличает его от иммуноферментного анализа, или ИФА.
• Анализ можно проводить с целью определения сразу нескольких возбудителей на основе одного образца биоматериала, благодаря чему данный метод становится удобным для пациента, ведь ему не придётся сдавать анализ несколько раз.
• Быстрота. Нет необходимости в выделении и выращивании возбудителя на особых питательных средах, что необходимо во время бактериологического обследования. Получить готовый результат можно уже непосредственно в день сдачи анализа.

• Посредством анализа крови ПЦР на гепатит, к примеру, производится определение скрытого возбудителя заболевания в организме, когда пациент выступает в качестве носителя инфекции (ВИЧ или гепатита).
• Доступная цена. Стоимость анализа ПЦР для определения одного возбудителя колеблется в пределах от двухсот пятидесяти до пятисот рублей. Полуколичественное обследование на вирусы стоит немного дороже – около тысячи рублей.

Недостатки метода

ПЦР представляет собой высокотехнологичный исследовательский метод, предъявляющий повышенные требования к лабораторному оснащению.

Помещение для проведения анализа должно обязательно иметь фильтр биологической очистки, поскольку в воздухе всё время имеются частицы слюны и кожи, в составе которых содержатся молекулы ДНК.

Если не соблюдать технические требования к работе с биоматериалами, то это способно стать причиной неправильного диагноза.

Кто должен сдавать анализ крови на ПЦР?

Пройти исследование может любой человек. Показанием к нему выступает подозрение на передающиеся половым путем инфекции (ВИЧ-инфекция, гарднереллез, хламидиоз). Если случайно произошёл незащищенный половой контакт, исключительно ПЦР позволит поставить верный диагноз ещё на раннем этапе, в случае если человек заразился тем или иным заболеванием.

Кровь на TORCH-комплекс в обязательном порядке сдаётся беременными женщинами, а также теми, кто пока только планирует зачать ребёнка.

Хотя ПЦР – это максимально эффективный способ диагностики, только на нём зацикливаться не нужно. Обследовать пациента при наличии любой патологии необходимо комплексно.

Если цепная полимеразная реакция даёт возможность определения возбудителя, то благодаря серологическому исследованию можно оценить уровень эффективности терапии, реакцию организма человека на возбудителя и медикаментозные средства. Анализ крови ПЦР на ВИЧ должен назначаться врачом.

Особенности процедуры и подготовки

Пациенты, которые обследуются с помощью ПЦР-методики, получают самый достоверный результат. Нужно сказать, что при этом вероятность ошибок практически полностью исключается. Довольно быстро готовятся и результаты данного анализа, благодаря чему облегчается определение диагноза и становится возможным своевременное назначение необходимых лечебных процедур.

Достоверность результата, полученного методом ПЦР, обусловливается правильностью сдачи биологического материала на обследование. Он не должен быть чем-либо загрязнен, в противном случае результат не будет объективным.

К числу важных рекомендаций перед проведением анализа относятся такие требования:

• запрет на половые контакты за сутки до процедуры;
• анализ крови для выявления инфекций нужно сдавать утром и только на голодный желудок;
• моча также сдаётся в утреннее время в стерильный контейнер.

Через полтора или два дня после проведения процедуры будет произведена расшифровка анализа крови ПЦР и готов результат. Бывают даже такие случаи, когда получить результат можно в тот же день.

Как подготовить материал к анализу?

Для того чтобы максимально успешно провести исследование, необходимо правильно взять у пациента материал и провести грамотную его подготовку. Общеизвестным является тот факт, что в лабораторном исследовании большое количество ошибок (примерно до семидесяти процентов) случается как раз-таки во время пробоподготовки.

В настоящее время в некоторых лабораториях кровь берётся с помощью вакуумных систем. С одной стороны, они в минимальной степени травмируют пациента, с другой – дают возможность взять материал так, чтобы он не контактировал ни с окружающей средой, ни с персоналом. Благодаря этому можно избежать загрязнения биологического материала и максимально обеспечить достоверность анализа.

Расшифровка результатов

Результат анализа крови на ПЦР может быть положительным и отрицательным. Если анализ крови отрицательный, то это свидетельствует об отсутствии инфекционных возбудителей в сданном пациентом материале. Положительный анализ выступает подтверждением того, что в крови имеются инфекционные агенты, а значит, требуется в максимальной степени эффективное и качественное лечение пациента.

Полученный результат может быть положительным даже при отсутствии каких-либо симптомов заболевания. Это свидетельствует или о начале патологического процесса, или о том, что человек является носителем.

В случае выявления последнего не требуются какие-либо лечебные процедуры.

Пациенту в таком случае рекомендуется постоянно наблюдаться у врача, что подразумевает, например, периодическое исследование анализа крови ПЦР на герпес и другие инфекции.

Чаще всего они обнаруживаются в уретре, в соскобе, произведённом из цервикального канала, в слюне.

Однако нужно помнить о том, что больной человек способен заразить совершенно здоровых людей, даже в том случае, если его никак не беспокоит данное заболевание. Оно может приобрести хронический характер.

Нужно сказать, что при положительном результате, полученном с помощью ПЦР, необходимо назначение соответствующих лечебных процедур.

Количественная характеристика ПЦР

Анализ крови ПЦР на инфекции характеризуется ещё и количественно. Такой результат может оцениваться исключительно специалистом, поскольку для различных инфекций он индивидуален. Именно количественная характеристика позволяет врачу определить степень активности такого патологического процесса, определить точный этап развития определённого заболевания.

Исследование полученных результатов поможет специалисту выбрать соответствующее лекарственное средство, конкретизировать необходимую дозировку.

Точность диагностики

1. Выделяется три самых важных характеристики ПЦР, а именно:
2. — чувствительность;
3. — специфичность;
4. — точность.

Диагностика инфекций с помощью ПЦР отличается высокой вероятностью обнаружения в организме инфекционных агентов.

Анализ крови и иных жидкостей является высокоспецифичным. Благодаря ему можно с лёгкостью определить конкретный инфекционный процесс, сдав, к примеру, анализ крови ПЦР на гепатит или ВИЧ. Также диагностика ПЦР отличается повышенной чувствительностью.

При наличии в исследуемом материале минимального количества инфекционных агентов способ ПЦР всегда будет положительным.

В очень редких случаях может быть получен ложноположительный результат. При отсутствии инфекции он, соответственно, будет отрицательным.

Выявление скрытых заболеваний

При подозрении у человека ИППП назначается анализ крови на определение скрытых инфекций. Любые заболевания половой сферы можно определить только с помощью обследования пациента.

Скрытый характер протекания могут иметь такие заболевания:

• уреаплазмоз;
• хламидиоз;
• микоплазмоз;
• герпес;
• гонорея;
• гарднереллез.

Данные инфекции являются достаточно распространёнными и очень коварными. В начале заболевания они не имеют хорошо выраженных симптомов, поэтому пациенты не обращаются к специалисту. Результаты своевременного анализа крови ПЦР на хламидии, боррелиоз и прочие инфекции помогут врачу назначить эффективное лечение.

ИППП отрицательно воздействуют на репродуктивную систему. Они могут стать причиной бесплодия либо появления у плода пороков. Именно поэтому важно перед планированием беременности сдать анализ ПЦР.

Источник: https://www.syl.ru/article/358947/chto-pokazyivaet-analiz-krovi-na-ptsr-kak-podgotovitsya-k-analizu

Пцр анализ в лечении гинекологических больных – о принципах проведения и достоверности

Для выбора правильного метода лечения инфекционных заболеваний необходимо установить тип возбудителя. Стандартные мазки и бактериологическое исследование не всегда позволяют выявить инфекцию, а вирусы невозможно получить на питательных средах. Поэтому в гинекологии, в частности, используют ПЦР-анализ, который эффективен на этапе диагностики патологии и контроля лечения.

Полимеразная цепная реакция – это метод молекулярной биохимии, который разработал в 1983 г. американский ученый К. Мюллис. Но его основы заложили еще в 1970 годах норвежские ученые, которые разработали способ построения копий молекул ДНК.

Американский ученый доработал метод, что позволило воспроизводить исходную молекулу любого генетического материала при помощи обработки специальным ферментом ДНК-полимеразой. Методика сделала переворот в молекулярной биохимии, а в 1996 году К.

Мюллису за изобретение присудили Нобелевскую премию.

Особенности исследования

ПЦР-диагностика отличается от других методов исследования. В искусственных условиях производится копирование небольшого участка нуклеиновой кислоты. Реакция запускается только в случае, если в исследуемом образце есть компонент ДНК, который соответствует заданным условиям.

Создание копии нуклеиновых кислот похоже на аналогичный процесс в живом организме, но в клетках создается полный образец, а ПЦР запускает синтез небольшого короткого сегмента. Длина копируемых оснований в ходе исследования составляет не больше 3000 пар, тогда как у человека – больше 3 млрд пар.

В медицинской практике используются разные типы исследований. Изначально анализ ПЦР на ИППП позволял определить только присутствие патогенных микроорганизмов.

В настоящее время разработан количественный анализ ПЦР, или в режиме реального времени, который выявляет изменение присутствия генетического материала в образце.

Поэтому в результате отражается число колониеобразующих единиц бактерий или количество вирусов.

Полимеразная цепная реакция в гинекологии применяется для поиска следующих микроорганизмов:

• хламидии;
• уреаплазмы;
• микоплазмы гоминис и гениталиум;
• трихомонады;
• гонококки;
• цитомегаловирус;
• герпес 1 и 2 типа;
• ВПЧ;
• гарднереллы;
• кандиды.

Достоинства и недостатки методики

Полимеразная цепная реакция значительно упрощает диагностику инфекционных заболеваний, которые встречаются у гинекологических больных. К достоинствам исследования относится его высокая чувствительность.

Некоторые заболевания могут иметь скрытый характер, не выявляются при помощи мазка и бактериологии, но протекают с периодическими клиническими проявлениями. Для получения положительного результата достаточно, чтобы в исследуемом материале присутствовало всего несколько фрагментов нуклеиновой кислоты.

Высокая чувствительность позволяет выявить вирусные заболевания через короткое время после инфицирования, когда клинические симптомы еще отсутствуют.

Среди других положительных аспектов выделяют следующее:

• для исследования подойдет любой биологический материал;
• комплексность – после взятия одной пробы можно провести обследование на множество микроорганизмов;
• высокая скорость – для получения копии генетического материала достаточно 5-7 часов, поэтому результат исследования выдается на руки в течение суток;
• высокая точность позволяет избежать ложноположительных или ложноотрицательных реакций, которые часто возникают при иммунологическом исследовании из-за перекрестных реакций;
• низкая стоимость реагентов делает исследование доступным для большинства лабораторий и пациентов.

К недостаткам комплексного анализа ПЦР относят высокие требования к получению биологического материала.

Образцы должны быть взяты стерильными инструментами, на которых не будет присутствия внешнего загрязнения или других клеток.

В помещении, где производят забор анализа, должны быть установлены качественные фильтры, которые очищают воздух на 99,9% от микробов, вирусов и фрагментов ДНК. Иначе результат может быть непредсказуемым.

Какой материал используют для диагностики

Для обследования на половые инфекции у женщин чаще всего берут мазок из заднего свода влагалища или уретры. Если взять отделяемое из преддверия влагалища, исследование может быть неверным.

Большая часть микроорганизмов поселяется в глубине складок слизистой оболочки.

На вульве вагинальная микрофлора может смешиваться с микроорганизмами с кожи, а у пациенток, активно использующих гигиенические ежедневные прокладки или носящих трусики-стринги, может присутствовать флора из прямой кишки.

Взятие мазка на ПЦР-анализ

Для исследования реже применяется моча. Диагностика вирусных инфекций проводится по образцу крови.

У женщин, родивших детей с признаками внутриутробной инфекции, после выкидыша, для диагностики может использоваться участок плаценты, материал абортуса.

Показания для обследования

Мазок на ПЦР назначают по определенным показаниям:

1. Определения состава возбудителей при имеющихся клинических проявлениях острой инфекции.
2. Хроническое воспаление половых органов с периодами обострений.
3. Контроль проведенного лечения.

Точность диагностики в комплексном анализе помогает выявить полный спектр возбудителей и подобрать лекарственные препараты. Некоторые микроорганизмы чувствительны к узкому спектру антибиотиков.

Например, трихомонады можно вылечить только Метронидазолом. Если его не назначить в составе комбинированной схемы, инфекция перейдет в хроническую форму.

Но и превентивное назначение антибиотика плохо влияет на собственную микрофлору, увеличивает риски появления побочных реакций.

ПЦР-диагностика назначается женщинам с эрозией или эктопией шейки матки. Воспалительный процесс экзоцервикса часто связан с инфицированием вирусом папилломы человека.

ВПЧ 16, 18, 33 типа относится к высокому онкогенному риску и способен вызвать атипическую трансформацию клеток, которая становится дисплазией и переходит в рак шейки матки.

Поэтому необходимо проводить обследование, во время которого определяется тип возбудителя, чтобы строить прогнозы и подбирать лечение.

При постановке на учет по беременности анализ проводится для поиска инфекции, которая может повлиять на вынашивание плода. Обследование назначают при положительных иммунологических тестах, в которых выявляются иммуноглобулины, свидетельствующие о присутствии возбудителя. Воспроизводство копий ДНК уточняет присутствие возбудителя вне зависимости от реакции организма на него.

Беременным необходимо обследование на цитомегаловирус. Первичное инфицирование в период вынашивания ребенка приводит к невынашиванию и тяжелым порокам развития (о том, чем опасен цитомегаловирус во время беременности, мы уже рассказывали).

Подготовка пациентки

Для получения точного результата необходима правильная подготовка к сдаче анализа, которая зависит от типа исследуемого материала.

Кровь для анализа берут из вены строго натощак. Последний прием пищи должен быть вечером, оптимальный промежуток до забора материала должно пройти не менее 8 часов. Плохо влияют на состав крови жирная и острая пища, алкоголь, некоторые лекарственные препараты.

Моча сдается рано утром. Необходимо собрать ее до проведения гигиенических процедур в стерильную тару. В случае сомнительного качества собранной мочи, ее можно собрать при помощи уретрального катетера напрямую из мочевого пузыря.

Для исследования мазка из уретры или влагалища методом ПЦР, необходимо воздержаться от секса в течение нескольких дней.

Запрещено проводить спринцевания и другие вмешательства, во время которых произойдет изменение состава флоры. Результат может оказаться неточным.

Перед взятием материала нельзя мочиться 2 часа, чтобы не вымыть микроорганизмы струей мочи. Женщинам не берут анализы во время менструации и в течение 2 дней после ее окончания.

Как выполняется ПЦР

То, как берут мазок, мало отличается от обычного забора отделяемого из влагалища. Процедура выполняется на гинекологическом кресле. Диагностика проводится в ближайшее время, но исследуемый материал может сохраняться долгое время.

Сама реакция состоит из нескольких этапов. Ее проводят в специальном приборе – амплификаторе. В нем происходят циклы нагревания и охлаждения с высокой точностью температуры. Чтобы биологический материал не испарялся, к смеси добавляют вазелиновое масло.

Для проведения полимеразной цепной реакции используют следующие компоненты:

• ДНК-матрица, которая содержит участок нуклеиновой кислоты, требующий воспроизведения;
• два праймера – коротких участка нутклеотда, которые нужны для воспроизводства матричной цепочки;
• термостабильный фермент ДНК-полимераза;
• нуклеозидфосфаты;
• магний в состоянии ионов;
• буферный раствор, который обеспечивает необходимую кислотность среды, содержит соли, бычий сывороточный альбумин.

Все исследование проходит в три стадии. Сначала выполняется денатурация. Матрицу ДНК нагревают до 98°С, чтобы ее две цепочки разошлись. Для разогрева достаточно от 30 секунд до 2 минут.

Во время денатурации происходит разрушение водородных связей в молекуле, она теряет структуру двойной спирали. В некоторых случаях проводится и предварительный разогрев праймеров.

Этот тип исследования называют горячим стартом, он помогает снизить количество побочных продуктов реакции.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

После денатурации запускается отжиг. В это время температуру смеси начинают снижать. Обычно она уменьшается на 4-5°С от исходной. Праймеры присоединяются к одноцепочечной ДНК.

Их подбирают с определенным составом, который помогает выделить и отграничить исследуемый участок нуклеиновой кислоты. Эта стадия длится 0,5-2 минуты.

Если температура подобрана неверно, праймеры могут не образовать связь с нужным участком молекулы или привязаться в неверном месте и образовать неверные продукты.

Последняя стадия – элонгация. Во время прохождения этого этапа подбирается оптимальная температура, которая подходит для используемой дезоксинуклеотидтрифосфаты. На каждую тысячу пар образующихся оснований нужно около 1 минуты. Этот этап длится 7-10 минут.

Этот цикл повторяется несколько раз.

Сколько по времени делается исследование?

Все зависит от поиска конкретного возбудителя, характера образца и количества искомых инфекций. Для получения ответа необходимо провести не менее 30 полных циклов амплификации, при длительности одного до 15 минут. Поэтому для получения результата нужно до 7 часов, а иногда и больше. Ответ выдается пациенту или отправляется лечащему врачу не позднее, чем через сутки после забора материала.

Результаты анализа и их расшифровка

Что показывает ПЦР-анализ, зависит от цели исследования. При качественном исследовании в бланке указывается наличие или отсутствие ДНК искомого возбудителя. Положительный результат обозначает присутствие инфекции, а отрицательный – отсутствие генетического материала.

Количественное ПЦР позволяет определить в режиме реального времени число молекул ДНК возбудителя. Это необходимо для диагностики условно-патогенных микроорганизмов, которые не требуют лечения в низких концентрациях. Такой подход применяют при диагностике уреа- и микоплазм.

Хламидии

Обследование на различные типы инфекции имеет свои особенности и показания. Анализ ПЦР на хламидии проводят чаще остальных. Это связано с широким распространением инфекции, бессимптомным течением у 60% женщин и большим количеством осложнений при хроническом инфекционном процессе. Обследоваться рекомендуется в следующих случаях:

• острые проявления вульвовагинита неясной этиологии;
• установление причины хронического воспаления половых органов;
• бесплодие;
• контроль эффективности лечения;
• скрининговое обследование.

Скрининг необходим у пациенток из групп риска, чтобы исключить бессимптомное носительство хламидий. Контроль излеченности проводится не ранее, чем через месяц после прохождения курса антибиотикотерапии.

Беременным предварительно проводится ИФА, чтобы определить наличие антител к хламидиям. Это обследование рекомендуется пройти в плане прегравидарной подготовки, чтобы при инфицировании провести лечение до наступления беременности и снизить риски осложнений как от самого возбудителя, так и от приема антибиотиков.

Уреаплазмы

Уреаплазмоз относится к инфекциям, вызванным условно-патогенной микрофлорой. Лечение не проводится при количестве менее, чем 10Х4 КОЕ.

Но при наличии клинических проявлений хронического воспаления, которое плохо поддается лечению, беременным назначается антибиотикотерапия.

Оптимально пройти исследование на этапе планирования беременности для уменьшения риска для плода. ПЦР на уреаплазмоз относится к обязательным исследованиям при бесплодии.

ВПЧ

Папилломавирусы приводят к появлению предраковых изменений шейки матки, но не все типы обладают таким потенциалом. Высоким онкогенным риском отличаются 16 и 18 типы, несколько ниже 33, 31, 51,52 и другие.

А ВПЧ 6, 11, 42 типа становятся причиной остроконечных кондилом и редко обнаруживается в злокачественных опухолях. Анализ необходим при дисплазии шейки матки, входит в пакет скринингового обследования.

Герпес

Для исследования может использоваться не только кровь, но и соскоб со слизистой оболочки половых органов. Обследование проводят:

• при подготовке к беременности;
• диагностированной ВИЧ-инфекции;
• боли при мочеиспускании и отсутствии признаков бактериальной инфекции;
• для дифференциальной диагностики генитальных инфекций.

В крови вирус определяется на 4 сутки после инфицирования. Он относится к хроническим инфекциям, которые могут иметь длительный период ремиссии и находиться в дремлющем состоянии в спинальных ганглиях.

Кандиды

Урогенитальный кандидоз в 15% случаев протекает в хронической форме. Иногда во время появления зуда и жжения в мазке не обнаруживаются клетки гриба или его гифы. Обследование и последующая расшифровка ПЦР-мазка помогает установить грибковую инфекцию. Анализ может определить тип кандид для подбора противогрибкового препарата.

Трихомонады

Одноклеточный микроорганизм не всегда можно обнаружить в мазке, но при этом у женщины будут присутствовать признаки хронического воспаления, ощущение зуда и жжения половых органов. Исследование необходимо при поиске причин бесплодия, цистите, эндометрите неясной этиологии, длительном воспалении.

В гинекологии анализ ПЦР используется в составе комплексной диагностики ИППП. Это достоверный метод определения возбудителя по фрагментам ДНК. Производится забор венозной крови или отделяемого из влагалища. Длительность проведения анализа – сутки.

Часто требуется проверка иммунного ответа организма на инфекцию, по присутствию определенных антител можно установить давность инфицирования и этап течения болезни, что не позволяет сделать ПЦР.

Источник: https://ginekolog-i-ya.ru/pcr-analiz.html

Пцр на кандиду: когда нужен анализ и как сдается

• Кандидоз – это инфекция, которая может развиваться эндогенно при снижении иммунитета.
• В некоторых случаях она развивается после экзогенного заражения при половом контакте.
• В результате заражения чаще всего развивается у мужчин кандидозный баланопостит.
• Для диагностики заболевания используют ПЦР.
• ПЦР – это молекулярно-биологический тест, основан на многократном копировании целевого участка ДНК.
• С помощью исследования можно обнаружить фрагмент генетического кода любого микроорганизма.
• Для каждых бактерий, грибов, вирусов они уникальные.
• Поэтому при помощи ПЦР можно с высокой точностью идентифицировать любой грибок.
• Определяется не только род Кандида, но и вид патогена.
• Поэтому при помощи исследования можно узнать, какой именно грибок спровоцировал воспаление.

Пцр на кандида альбиканс

1. Наименее опасным и наилучше поддающимися терапии грибком является кандида альбиканс.
2. Он же встречается чаще других.
3. По приблизительным оценкам не менее 80% всех случаев урогенитального кандидоза вызвано этим видом грибка.
4. Особенности этих заболеваний:

• реже рецидивируют
• быстрее излечиваются
• редко дают осложнения
• редко встречаются случаи резистентности к антимикотическим средствам

• Часто факт кандидоза можно установить клинически и микроскопически.
• Зачем в таком случае делают тест ПЦР на молочницу?
• Целей несколько:

• если симптомы слабо выражены, ПЦР позволяет получить количественные показатели и определить показания к лечению
• после лечения ПЦР показывает, насколько успешным оно было, можно ли заканчивать терапию или требуется ещё один курс
• при возникновении затруднений в лечении ПЦР помогает определить вид кандиды, ведь не все кандидозы вызваны кандидой альбиканс

Пцр на кандида глабрата

Candida glabrata – редкий возбудитель воспалительных процессов.

Обычно этот вид грибка обитает на коже как сапрофит.

1. У лиц с нормальным иммунитетом он не вызывает никаких осложнений.
2. А вот у пожилых, ослабленных или ВИЧ-инфицированных пациентов воспалительные реакции вполне возможны.
3. ПЦР на Candida glabrata проводится с целью определения оптимальной терапевтической тактики.
4. Потому что разные кандиды чувствительны к разным препаратам.
5. Чаще всего кандидоз пытаются лечить флуконазолом.
6. И в случае, если патология вызвана кандида альбиканс, он действительно работает.
7. Но у Candida glabrata часто встречается резистентность к этому препарату.
8. Она также зачастую невосприимчива ко многим другим препаратам.
9. В 20% случаев на этот грибок не действует кетоконазол и миконазол.
10. Она остается чувствительной к нистатину и амфотерицину В.
11. Именно эти препараты предпочтительны для борьбы с кандидозом, вызванным Candida glabrata.
12. Препаратом первого выбора также может быть терконазол.

Пцр на кандида крузеи

• Candida krusei – ещё один возбудитель кандидоза.
• Чаще всего выявляется у пациентов с ВИЧ или злокачественными новообразованиями.
• Иногда вызывает урогенитальный кандидоз.
• Чувствительность к флуконазолу отсутствует в большинстве случаев.
• Эта кандида одна из самых опасных.
• Смертность от неё гораздо выше, чем от кандида альбиканс.
• Препараты, которые могут быть использованы для лечения:

• вориконазол
• микафунгин
• амфотерицин В

Обычно лечение кандидоза этими препаратами не проводят.

Их назначают лишь в случае выявления в ходе ПЦР атипичных кандид.

Откуда берется ПЦР на кандиду

1. Кандида – это условно-патогенный гриб.
2. Он присутствуют в различных «уголках» человеческого тела.
3. Этот грибок можно обнаружить в кишечнике, во рту, на коже, на слизистой мочеполовых путей.
4. Соответственно, брать мазок для ПЦР на кандиду можно из различных участков тела.
5. Всё зависит от того, где имеет место воспалительная реакция.
6. Обычно берут мазок или соскоб на кандиду:

• с головки члена
• уретры
• из влагалища
• с кожи промежности
• изо рта
• из ануса

У мужчин ПЦР на кандиду могут проводить, используя сперму, мочу или секрет простаты.

Как подготовиться к ПЦР на кандиду?

Способ подготовки зависит от того, откуда будет браться биоматериал.

Чаще всего его берут из поверхности головки пениса, вульвы и влагалища.

В этом случае необходимо соблюдать ряд рекомендаций, которые ставят своей целью:

• сохранение высокой чувствительности ПЦР тест на кандиду
• точное определение количественных показателей, которое будет отражать реальную интенсивность воспалительного процесса

• Чтобы правильно подготовиться, нужно строго соблюдать ряд ограничений.
• Нельзя применять препараты кроме тех, что назначены врачом и являются жизненно необходимыми.
• Не стоит применять для самолечения любые лекарства или народные средства.
• Нельзя промывать половые органы антисептиками, принимать внутрь антибиотики или противогрибковые средства.
• Не стоит вступать в любые интимные контакты в течение 2 суток.
• В том числе ограничение касается и половых связей с использованием средств барьерной контрацепции.
• За 2 дня до анализа нельзя использовать лубриканты, спермициды, любые другие кремы, гели, мази, для какой бы цели они не применялись.
• Женщинам нельзя:

• применять тампоны
• проводить УЗИ с помещением датчика во влагалище
• делать спринцевания
• использовать вагинальные суппозитории
• проходить гинекологическое обследование
• делать кольпоскопию, гистероскопию или другое инструментальное исследование

У женщин анализ берут через несколько дней после окончания менструаций.

В противном случае тест ПЦР может дать искаженные результаты.

Пцр на кандиду количественный

1. При многих инфекциях используются качественные тесты ПЦР.
2. Это возможно, если микроорганизм, на который пациент обследуется, является патогенным.
3. То есть, если сам факт его обнаружения – это уже показание к назначению терапии.
4. Но кандида к числу таких микроорганизмов не относится.
5. Это условно-патогенный грибок.
6. Если собрать полностью здоровых людей и провести всем качественную ПЦР на кандиду, то он будет выявлен у большинства из них.
7. Но это не значит, что все больны.
8. Просто кандида присутствует в минимальном количестве постоянно.
9. Но грибков настолько мало, что они не вызывают воспалительных процессов.
10. Патология возможна лишь при значительном увеличении концентрации грибковых клеток.
11. Вот почему при подозрении на кандидоз проводится количественная ПЦР.

• Результаты врач получает в копиях ДНК на мл.
• Пороговым значением считается 10 в 4 степени.
• Если кандид столько или больше, необходимо лечение.
• Причем, даже в том случае, если клинические признаки заболевания отсутствуют.
• Потому что при такой концентрации грибков симптомы появятся в самое ближайшее время.
• В то же время концентрация кандид 10 в 3 степени и меньше считается нормой.
• При таком количестве грибков лечение не назначают, если нет симптомов молочницы.

Когда ПЦР на кандиду положительный после заражения

1. Исследование ПЦР обладает очень высокой чувствительностью.
2. Поэтому тест может дать положительный результат практически сразу после заражения кандидой.
3. Другое дело, что если это качественный положительный результат, не факт, что нужно сразу же назначать лечение.
4. Потому что при заражении только у небольшого процента людей начинаются воспалительные процессы.
5. У остальных кандида просто колонизирует урогенитальный тракт.
6. Она живет на слизистых и коже, не вызывая никаких проблем, и не доставляя хозяину каких-либо неудобств.
7. Почти у каждого из нас в тех или иных участках тела живут кандиды.
8. Мы их не замечаем и даже не знаем об их существовании.
9. ПЦР есть смысл сдавать на кандиды после полового контакта, только если появляются симптомы.
10. Чаще всего после полового контакта развиваются признаки баланопостита у мужчин.
11. Тогда проводится микроскопия или ПЦР.
12. Подбирается лечение, исходя из выявленного вида грибка.

При каких симптомах делают ПЦР на кандиду

Появление клинических признаков кандидоза – это повод обследоваться на кандиду с использованием ПЦР или других методов.

Симптомы при этой патологии возникают следующие:

• творожистые выделения из влагалища
• покраснение слизистой
• появление эрозий
• образование болезненных трещин
• сухость слизистых
• боль при половом контакте
• формирование папул и пустул на коже
• образование красных пятен, покрытых белым налетом

У 5% пациентов кандидоз становится рецидивирующим.

• Это прямое показание для проведения ПЦР и видовой идентификации возбудителя.
• Рецидивирующим считается кандидоз при количестве обострений этого заболевания 4 и более за год.
• Иногда рецидив на самом деле представляет собой реинфекцию.
• Потому что кандидоз вполне может присутствовать у полового партнера.
• Сам он может не страдать от воспалительных процессов.
• Но при этом передает кандиду снова и снова, потому что является резервуаром инфекции.

Контроль эффективности после лечения кандиды

1. После лечения необходимо контрольное исследование.
2. ПЦР назначают спустя 2-4 недели после проведенной терапии.
3. Определяются количественные показатели.
4. Положительным результатом лечения считается:

• устранение кандиды из организма
• снижение концентрации грибков до 10 в 3 степени и меньше
• исчезновение симптомов

Если лечение оказалось неэффективным, тактика может быть следующей:

• посев с определением чувствительности к различным препаратам
• ПЦР с определением вида кандиды, если исследование не было проведено раньше
• эмпирическое назначение препарата другой фармакологической группы

Причин неэффективности лечения может быть много.

Наиболее частые из них:

• несоблюдение пациентом врачебных рекомендаций
• нечувствительность грибка к назначенному препарату
• повторное заражение кандидой от полового партнера

Сравнение ПЦР на кандиду с посевом

• Посев чаще всего используется при хроническом или рецидивирующем течении кандидозной инфекции.
• Основной целью проведения является не столько идентификация вида грибка (хотя это тоже возможно), сколько проверка его восприимчивости к различным препаратам.
• Если лечение не работает, причина может заключаться в резистентности кандиды к большинству лекарств.
• Посев на кандиду выгодно отличается от ПЦР тем, что помогает выбрать тот препарат, к которому грибок наиболее чувствительный.
• Но он имеет недостатки.
• Первый – это меньшая чувствительность.
• На фоне антимикотической терапии или при неправильном заборе образца можно получить ложноотрицательный результат.
• Второй – длительность.
• Диагностика занимает несколько дней.
• Третий – стоимость.
• Она выше, чем у ПЦР.
• Обычно рост колоний занимает 3 дня.
• Ещё 1 день уходит, чтобы провести видовую идентификацию грибков и проверить их на чувствительность к антимикотическим лекарственным средствам.
• Обычно проверяют на такие препараты:

• амфотерицин В
• флюконазол
• итраконазол
• кетоконазол

Результаты обозначаются буквами S (чувствительный), R (нечувствительный) или I (малочувствительный).

Приставка DD означает, что кандида погибает только при максимальной концентрации данного антимикотического средства.

В какие комплексные анализы пцр входит

1. Многие лаборатории предлагают комплексные тесты для тех, кто желает проверить состояние здоровья своего мочеполового тракта.
2. Используется для этого ПЦР.
3. Методика позволяет однократно взятый мазок проверить сразу на несколько различных патологий.
4. Часто используются комплексные обследования ПЦР на 12 или 15 инфекций.
5. Они дают возможность не пропустить ни одного патогена.
6. Кандида относится к микроорганизмам, для которых характерен половой путь передачи.
7. Поэтому этот грибок тоже входит в комплекс.
8. Одновременно кандида остается эндогенной инфекцией.
9. То есть, развивающейся не после заражения от другого человека, а в результате снижения защитных сил организма.
10. По такому механизму болезнь чаще развивается у женщин.
11. У них кандидозный вульвовагинит возникает и без предшествующего полового контакта с носителем инфекции.
12. Это может быть результат антибиотикотерапии, дисбактериоза или переохлаждения.
13. Поэтому кандида входит в комплекс Фемофлор.
14. Он выполняется для оценки состояния биоценоза влагалища.
15. Различные виды микроорганизмов определяются при помощи ПЦР количественным методом.
16. Это лактобактерии, гарднереллы, микоплазмы, уреаплазмы и многие другие микроорганизмы.
17. Включаются в этот комплекс и кандиды.
18. Они могут быть ассоциированы с дисбиозом влагалища и быть одной из причин этого состояния.

Куда обратиться для ПЦР диагностики кандиды?

Сделать ПЦР для выявления кандидозной урогенитальной инфекции можно в нашей клинике.

Наши преимущества:

• мы отправляем материал только в лучше лаборатории, поэтому получаем точные результаты
• возможно проведение ПЦР на разные виды кандид, что позволит подобрать наилучшее лечение
• мы берем мазки из уретры безболезненно, потому что используем обезболивающий гель
• у нас можно обследоваться при необходимости и на другие половые инфекции
• при необходимости возможна диагностика урогенитального кандидоза и другими методами (посев, микроскопия)

• Если кандиды будут выявлены, мы подберем эффективную схему лечения.
• Наши врачи используют препараты, исходя из выявленного вида гриба, что позволяет свести к минимуму риск неэффективной терапии или рецидива кандидоза после лечения.
• Для сдачи ПЦР на кандидуобращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Источник: https://proctologys.ru/venericheskie-bolezni/pcr-na-kandidu-kogda-nuzhen-analiz-i-kak-sdaetsya/

Мазок ПЦР: что это такое и зачем его используют

Одним из наиболее информативных и распространенных методов определения заболеваний в урогенитальной сфере, если на это имеются медицинские показания, является высокоинформативный анализ, который именуют мазок ПЦР. Он позволяет определить из небольшого количества биоматериала (слюны, мокроты, крови, слизи) генетическую информацию возбудители половых инфекций и иных патологий.

Содержание

• 1 Мазок ПЦР: что это такое
• 2 Правила сдачи и точность

Мазок ПЦР: что это такое

Выявляемая в результате исследования цепная реакция обеспечивает выявление инфекций разного плана:

• кандидоз;
• уреаплазмоз;
• трихомониаз;
• хламидиоз;
• гарднереллез;
• ВПЧ;
• микоплазмоз;
• герпесвирусную инфекцию.

Применяют ПЦР у женщин для выявления скрытых инфекций:

• листериоза;
• вирусного гепатита;
• токсоплазмоза;
• цитомегаловирусной инфекции;
• энтеровирусной инфекции и инфекционного мононуклеоза.

Кроме того врач венеролог либо уролог, иной врач, непременно высшей категории, может использовать такую диагностику с целью определения вируса человеческого иммунодефицита. К достоинствам ПЦР мазка относятся:

• точность определения возбудителя;
• способность выделить непосредственно вирус, не принимая его за антитела либо продукты распада;
• использование небольшого объема исследуемого биоматериала, взятого полимеразно из цервикального канала внутри шейки матки;
• определение паразита в различной среде (слизи, крови, моче либо слюне);
• быстрота проведения анализа;
• это единственный способ, определяющий некоторые виды инфекций.

Правила сдачи и точность

У женщин подобный мазок методом ПЦР выполняется посредством взятия материала из влагалищной поверхности и маточной шейки. Для получения достоверного результата исследования анализ требует соблюдения определенных простых правил. Подготовиться к мазку достаточно просто.

Используя такую методику, организуют диагностику и адекватное лечение воспалений, блокируют развитие раковых опухолей. Сама подготовка к тому, чтобы сдать кровь на ПЦР, состоит в следующем:

• следует выбрать для отбора мазка день непосредственно после окончания месячных;
• запрещено спринцевать влагалище минимум сутки перед анализом;
• когда предполагается брать мазок из ротовой слизистой, перед обследованием следует воздержаться от питья и еды несколько часов;
• сдавать анализ лучше натощак утром;
• нежелательно 2 часа перед уретральным мазком мочиться;
• также не рекомендуют мочеиспускание, когда предстоит забор влагалищного материала;
• нельзя употреблять неделю любые антибактериальные средства перед анализом;
• следует воздержаться от интимной жизни двое суток перед обследованием;
• все гигиенические процедуры требуется выполнить вечером.

Сама процедура нуждается в предварительной подготовке. Женщинам необходимо соблюдать список таких рекомендаций:

• трое суток перед анализом не выполнять физических половых контактов;
• мочу следует сдавать утреннюю, ее собирать нужно после подмывания;
• за трое суток следует прекратить использование вагинальных средств;
• процедуру запрещено выполнять после кольпоскопии, при месячных – сдавать мазок разрешено только спустя несколько дней;
• следует прекратить употребление антибактериальных лекарств минимум за месяц до процедуры;
• уже с вечера нельзя выполнять гигиенических процедур, касающиеся исследуемой области.

Интересная статья «что такое полип?«

Материалы, отобранные у женщины, смешивают с определенным реактивом, который выявляет присутствие чужеродных ДНК внутри человеческих выделений.

Специальные ферменты вызывают цепную реакцию ускоренного роста ДНК молекул патогенных микроорганизмов, поэтому если сдавать мазок ПЦР – можно их выявить. Кроме обнаружения присутствия в тканях возбудителя, мазок предоставляет возможность установить число бактерий и их вид.

Мазок ПЦР: что это и зачем его используют? Ссылка на основную публикацию

Источник: https://bezbesplodie.ru/diagnostika-besplodiya/mazok-ptsr-chto-eto