Пцр анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Ответить на вопрос: «Что это такое, ПЦР анализ?» – можно в нескольких словах. Полимеразная цепная реакция является методом лабораторных исследований, который используют для определения присутствия ДНК возбудителей болезней в любой из жидких сред организма, куда этот ДНК может проникнуть: кровь, моча, слюна, сопли, выделения из половых органов, кал.

Благодаря этому ПЦР обладает намного большей чувствительностью к патогенам по сравнению с другими методами исследования. Например, иммуноферментный анализ может показывать отрицательный результат на наличие бактерии или вируса, тогда как ПЦР анализ даст положительный в силу большей чувствительности.

Как проводят анализ?

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Процесс амплификации (так называют увеличение количества копий ДНК) – лишь одна из частей анализа. После того, как произведена реакция, амплифицированные сегменты надо сравнивать с другими нуклеотидными частями, которые принадлежат источнику (например, человеку или патогену).

Это сравнение уникальных сегментов производят в желеобразной среде путём сопоставления нуклеотидных звеньев, которые генерируются анализатором ПЦР с искомыми нуклеотидными звеньями конкретного человека или микроорганизма. После того, как через эту среду пропускают электрический ток, нуклеотидные звенья связываются друг с другом, образуя цепочки ДНК, которые группируются в изучаемой среде, что позволяет произвести их идентификацию.

Туберкулез, ВИЧ и ПЦР

Особо ценен метод ПЦР при диагностике болезней, обнаружить которые непросто на начальной стадии. Например, возбудители туберкулёза тяжело выявляются простыми методами исследования, тогда как ПЦР способен обнаружить как живых, так и погибших возбудителей болезни.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Очень важно значение метода ПЦР при обнаружении вируса иммунодефицита. Методы анализа, которые использовались ранее для диагностики ВИЧ-инфекции, основывались на присутствии в крови антител.

Такой метод имеет минусы, поскольку антитела против этой опасной болезни могут появиться лишь спустя месяцы после проникновения в организм инфекции.

А если речь идет о грудничках, сложность в идентификации вируса еще и в том, что материнские антитела в крови могут замаскировать наличие ВИЧ-инфекции у новорожденного.

ПЦР диагностирует это заболевание значительно быстрее, поскольку способен обнаружить всего один геном вируса на пятьдесят тысяч клеток. При этом высокая специфичность анализа позволяет нацелиться на определение именно возбудителя вируса иммунодефицита.

Пцр и мочеполовая система

Широкое распространение метод ПЦР получил в исследовании функционирования мочеполовой системы женщин и мужчин. Анализ мочи в данном случае представляет собой поиск в урине ДНК возбудителей инфекций.

Огромным преимуществом ПЦР является то, что исследование мочи этим методом способно обнаружить все половые болезни. Кроме того, этот анализ способен выявить возбудителя туберкулёза, который не относится к половым инфекциям.

Стрептококки и некоторые вирусы также определяются по анализу ПЦР во взятом образце мочи.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Исследование анализа мочи само по себе является точным диагностическим показателем. Но гораздо лучше, если он дополняется анализом ПЦР мазка, поскольку изучение мочи показывает возбудителей болезни лишь в том случае, если патоген локализуется в местах, через которые проходит моча. А именно, через:

  • почки;
  • мочеточники;
  • мочевой пузырь;
  • уретру.

Если возбудитель болезни находится в предстательной железе или яичках у мужчин или в матке у женщин, проба мочи на ПЦР не покажет присутствие инфекции. В этом случае нужно брать мазок из предстательной железы у мужчин или из шейки матки у женщин.

В целом в лабораториях, которые специализируются по анализу мочи методом ПЦР, возможно определить несколько десятков различных инфекций.

Для анализа сдаётся первая порция мочи, поскольку в это время концентрация бактерий в ней максимальна. К сбору мочи надо приступать с утра.

Перед этим желательно не принимать антибиотики, противовирусные препараты в течение двух недель. Если это невозможно, необходимо посоветоваться с врачом.

Пцр и мазок

ПЦР используется в гинекологии и андрологии как высокоточное средство обнаружения инфекции. Как у женщин, так и у мужчин этот метод применяется для диагностики урогенитальной инфекции. Для анализа со слизистой оболочки органов женщины берётся мазок на ПЦР со слизистой оболочки матки и влагалища, у мужчин – с передней уретры.

Показаниями к проведению ПЦР у женщин и мужчин являются:

  • Выяснение причин бесплодия.
  • Болезни, передающиеся половым путём.

Анализ мазка у женщин и мужчин методом ПЦР позволяет выявить такие инфекционные заболевания, как хламидии, молочница, трихомонады, гепатит, вагиноз, мононуклеоз, микоплазмоз, рак и другие заболевания.

Особенно опасны для женщин болезни, передающиеся половым путём, поскольку они могут оказать негативное влияние на здоровье ребёнка. Поэтому анализ ПЦР при беременности является обязательным в гинекологии.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Перед проведением ПЦР анализа женщина должна хорошо подготовиться. Прежде всего, за месяц перед анализом нужно прекратить употребление лекарственных препаратов. Во время месячных этот анализ не проводят.

Изучение экскрементов

Анализ кала методом ПЦР также позволяет изучить немало показателей.

Дело в том, что кал являет собой шлаки, остатки непереваренной пищи, различных продуктов распада, которые организм выводит через кишечник в процессе жизнедеятельности.

Поэтому если кал разложить на составляющие, в нем можно найти вещества, позволяющие исследовать состояние пищеварительного тракта, функционирование жёлчного пузыря, обнаружить кровотечения.

Здесь же присутствуют различные бактерии, гельминты и другие паразитические микроорганизмы. Вот почему не удивительно, что застой кала в толстой кишке способен вызвать отравление организма.

Во время исследования кала преимущество метода ПЦР перед другими анализами в том, что полимеразная цепная реакция способна определить непосредственное присутствие в кале возбудителей болезни по ДНК патогена.

Тогда как остальные способы исследования лишь косвенно, по следам отходов жизнедеятельности обнаруживают их присутствие в кале.

Ещё одним преимуществом метода ПЦР при исследовании кала являются высокая чувствительность и скорость получения результата.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Например, метод ПЦР во время исследования кала быстро позволяет обнаружить у женщин и мужчин такое широко распространённое заболевание, как лямблиоз. Известно, что лямблии даже если присутствуют в организме, могут годами ничем не выдавать своего присутствия.

Во время сдачи кала на ПЦР пациент должен особенно четко придерживаться правил личной гигиены. Во время забора материала он должен проследить, чтобы в образец кала не попали посторонние вещества (например, следует избегать попадания мочи).

Интерпретация данных

Если говорить о расшифровке анализов ПЦР, в первую очередь нужно обратить внимание на то, какая формулировка использована в расшифровке. То есть положительный или отрицательный результат.

Слово «отрицательный» в расшифровке анализа зачастую говорит о том, что в представленном образце биологического материала инфекция не была обнаружена. Таким образом, отрицательный результат анализа ПЦР означает, что ДНК искомого возбудителя болезни в организме нет.

Означает ли это, что при отрицательном результате можно не делать других анализов и проходить обследования? Отвечая на этот вопрос, всегда надо учитывать, что ПЦР может дать ложный, отрицательный результат, если инфекция в латентном или хроническом состоянии. В таком случае другие методы диагностики окажутся более эффективными и способны дать более четкую картину о том, сколько патогенов в изучаемом образце.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Интересно, что хоть иммуноферментный анализ считается менее точным, возможен вариант, когда он будет показывать более достоверные результаты. Например, если на стадии ремиссии ПЦР показывает, как правило, отрицательный результат, ИФА дает положительный ответ, обнаружив антитела к инфекции.

Таким образом, ещё одним фактором, влияющим на расшифровку ПЦР, является сила иммунитета человека. Если иммунная система работает в полную силу, присутствие антител можно зафиксировать уже на начальных стадиях заболевания.

Вместе с тем, если отсутствуют жалобы у пациента и присутствуют антитела при отрицательном результате ПЦР, это говорит о том, что лечение в настоящий момент не требуется.

Но при этом грамотный врач будет учитывать присутствие возбудителей, и при необходимости назначит иные анализы.

Таким образом, подобный случай является примером того, когда отрицательный результат ПЦР требует дальнейшего исследования.

Плюсы и минусы ПЦР

Таким образом, если говорить о положительных и отрицательных сторонах изучения материала методом полимеразной цепной реакции, то можно сказать, что к достоинствам ПЦР можно отнести:

  • Прямое и непосредственное выявление возбудителей болезней, в отличие от других методов, что основываются на косвенных показателях.
  • Специфичность и точность метода, его узкая направленность на конкретного возбудителя.
  • Высокая чувствительность данного метода, обнаружение патологических агентов вне зависимости от того, сколько их есть (даже в единичных случаях присутствия).
  • Универсальность метода позволяет использовать любые вещества жидкой среды организма, такие как мокроты, моча, кровь, слизь и другие.
  • Скорость анализа (если говорить о том, сколько делается анализ ПЦР, то много зависит от лаборатории: от нескольких часов до нескольких суток).

К недостаткам данного метода можно отнести то, что положительный результат возможен даже в том случае, если возбудитель инфекции будет мёртв, что может быть результатом лечения.

Также следует помнить, что любой микроорганизм способен к генетической мутации. Например, каждый год возникают новые штаммы вирусов гриппа.

И теоретически возможна ситуация, что ДНК вируса изменится до такого состояния, когда она уже не будет определяться ПЦР, поскольку не будет образца, с которым он будет сравниваться.

Минусом также может быть цена анализа: не каждый может позволить себе сделать полное обследование.

Вызвано это тем, что аппаратура и химические реактивы производятся и импортируются из США и Европы, что в основном и влияет на то, сколько стоит этот анализ. Цены на ПЦР могут колебаться около одной тысячи рублей за одно исследование.

Однако то, сколько он стоит, с лихвой окупается его повышенной точностью, что очень важно, если в организме развивается опасная патология.

Источник: http://ProAnalizy.com/vidy/ptsr-analiz-chto-eto-takoe.html

Что такое диагностика ПЦР и как ее проводят

Полимеразная цепная реакция (сокращённо ПЦР) – современный и сверхточный метод диагностики на генетическом и молекулярном уровне. ПЦР-диагностика дает возможность определить у человека наличие инфекции или наследственной болезни.

Сущность метода состоит в том, что ДНК либо РНК взятого на исследование материала подвергается многократному преумножению (амплификации), что возможно при наличии ферментов.

Благодаря этому получают большую массу ДНК либо РНК, по которой делают визуальную оценку.

Читайте также:  Анализы на сифилис после лечения, когда сдаются и какие должны быть.

У специалистов имеется база сведений о строении всех болезнетворных возбудителей и в соответствии с ней дается оценка, какой микроорганизм получили.

Исследуемый материал (слюна, кровь, мокрота, др.) помещают внутрь специального прибора (амплификатор) и добавляют определенные ферменты. Они соединяются с исследуемыми ДНК либо РНК и вызывают синтез их копий. Посредством ПЦР возможно определить тип возбудителя, его количество.

Интересно! Метод ПЦР был изобретён в 1983 году американским учёным Кэрри Мюллисом. За это открытие ему была вручена Нобелевская премия по химии.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Пробирки с исследуемым материалом

Плюсы и минусы

Методика ПЦР стала применяться в сфере медицины с недавнего времени и заняла важное место в диагностическом процессе.

Преимущества метода:

  1. Прямое определение возбудителя. Некоторые методы, к примеру, иммуноферментный анализ, даёт возможность выявить выделяемые микробами белки. Это косвенное определение присутствия возбудителей. А посредством ПЦР с высокой точностью выявляется кусочек ДНК, принадлежащий определённой инфекции.
  2. Специфичность методики. Поскольку ПЦР выявляет ДНК, принадлежащему возбудителю, получить ложное заключение практически невозможно (за исключением неизвестного возбудителя). А при иммунологическом методе может произойти ошибка вследствие перекрёстной реакции между антигенами.
  3. Большая чувствительность. Метод определяет присутствие даже очень малого количества бактерий либо вирусов в организме. Достаточно 10 болезнетворных клеток на одну пробу. Для других методов минимальное количество клеток должно быть не менее 105.
  4. Универсальность методики. Процесс исследования в отношении разных микроорганизмов схож из-за подобия всех ДНК, РНК. На основании этого в одной пробе возможно выявить несколько возбудителей.
  5. Быстрое получение заключения. От момента забора пробы до получения результата проходит не более 4-5 часов. При ПЦР не нужен посев культуры, поэтому метод довольно быстрый.
  6. Эффективность диагностирования при скрытых видах инфекций. Метод выявляет те микроорганизмы, которые трудно или вовсе не поддаются культивированию. Такие возбудители встречаются при скрытых формах заболевания.
  7. Широкая сфера использования. ПЦР может быть использована не только в целях диагностики болезней человека, но и для определения микроорганизмах в почве, продуктах, воде и пр.

Но можно столкнуться и с недостатками ПЦР-метода:

  1. Микробы способны изменяться. Возбудители могут меняться и мутировать. Поэтому они могут не поддаваться определению посредством ПЦР.
  2. Возможность умножения ДНК не только живого, но одновременно и мёртвого возбудителя. Чтобы избежать такой ситуации, использовать ПЦР можно только через 1-2 месяца после восстановления от перенесённой ранее болезни.

Разновидности ПЦР

Метод исследования применяется для различных целей, поэтому ПЦР-методика имеет разновидности:

  1. С обратной транскрипцией – применяется для многократного удвоения и последующего определения того, РНК какого микроорганизма получилось выделить. Для этого используют библиотеку данных о структурах различных возбудителей.
  2. Инвертированная – используется, когда имеется маленький участок внутри конкретной последовательности.
  3. Вложенная – применяют для уменьшения количества нежелательных продуктов реакции. Для этих целей проводят два последовательных исследования.
  4. Асимметричная – применяют в случае, если нужно умножить в большей степени одну из всех имеющихся цепочек ДНК.
  5. Количественная (в реальном времени) – необходима для непосредственного изучения того, как меняется количество получаемого продукта в каждом новом цикле реакции ПЦР.
  6. Цифровая – наиболее современная и точная.
  7. Групп-специфическая – это такое исследование, которое проводится в целях изучения родственных связей.
  8. Ступенчатая – снижает влияние неспецифического взаимодействия праймеров.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.Асимметричная ПЦР ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.Инвертированная ПЦР ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.Обратная транскрипция

Сферы применения метода

В процессе диагностики ПЦР очень помогает медикам. Через этот анализ получается практически безошибочно выявить конкретные вирусы и бактерии.

Метод успешно применяется в сферах:

  • урологии;
  • гематологии;
  • фтизиатрии;
  • гинекологии;
  • пульмонологии;
  • неонатологии.

При использовании диагностики можно определить, насколько действенно будет лекарство для конкретного пациента, вызовет ли препарат аллергию, побочные эффекты.

В других сферах жизни ПЦР-методика также применяется:

  1. Криминалистика. Оставшиеся на месте преступления «следы» (кровь, волосы, сперма, слюна, др.) исследуют с помощью ПЦР. Полученные данные сравнивают с ДНК подозреваемого.
  2. Установление отцовства. ДНК родителя и ребёнка будут схожи при проведении ПЦР.
  3. Клонирование генов. В результате его организм приобретает другие свойства.
  4. Иные научные цели.

Кому нужно делать диагностику?

Обратиться для сдачи анализов методом ПЦР может любой желающий. Самым первым показанием для этого служит подозрение на половую инфекцию. ПЦР поможет доктору установить диагноз на ранней стадии заболевания.

Рекомендуют метод обследования женщинам в положении и планирующим беременность. Благодаря своевременно поставленному анализу и вовремя начатому лечению при наличии инфекции, можно будет снизить риск рождения больного малыша. В случае если ребенок все же заразился, то это поможет избежать серьезных осложнений.

Материал для исследования и правила его забора

Для лабораторного ПЦР-исследования используют различный биоматериал в зависимости от предполагаемого заболевания. Подробнее о материалах и правилах забора, смотрите таблицу ниже.

Материал Правила забора Объем материала
Эпителиальный соскоб или мазок При использовании специального ёршика. Попадание крови недопустимо.Возможно брать с поверхностей:

  • уретры;
  • конъюнктивы;
  • слизистых дыхательных путей;
  • цервикального канала
Моча Собирать только проснувшись в стерильно чистую ёмкость 50 мл
Мокрота В стерильную баночку Примерно 20 мг
Кровь и её компоненты Берётся из вены, пациент должен прийти натощак Около 1,5 мл
Биологические жидкости Материал берётся стерильным инструментом.Могут быть исследованы:

  • слюна;
  • околоплодные воды;
  • спинномозговая и суставная жидкости;
  • сок простаты
Примерно 1,5 мл
Биоптата (материал, получаемый при биопсии) Обычно берут из желудка, двенадцатипёрстной кишки До 3 мг

Какие инфекции позволяет выявить мазок на ПЦР?

Метод применяется в диагностике следующих инфекционных болезней:

  • ВИЧ;
  • инфекции мочевыводящих путей;
  • гепатит;
  • листериоз;
  • цитомегаловирус;
  • туберкулёз;
  • вирус папилломы (ВПЧ);
  • клещевой энцефалит;
  • заражение глистами;
  • половые болезни;
  • хеликобактерная инфекция;
  • герпес.

 Загрузка …

На видео можно увидеть процесс исследования и его преимущества. Снято каналом Dixi dailydiary.

Подготовка к сдаче материала

Для получения корректного результата необходимо придерживаться определённых правил. Тест делают в момент обострения болезни. За 3 суток до исследования необходимо приостановить прием лекарств, особенно антибиотиков. Повторить анализ нужно через месяц после выздоровления. Забор делают при помощи стерильных одноразовых инструментов.

Подготовка к ПЦР-должна быть следующей.

По поводу какой болезни проводится исследование Пол пациента Меры по подготовке
Гепатиты (берётся кровь) Мужчины, женщины
  • прийти натощак;
  • избегать излишних физических нагрузок;
  • не курить за час до сдачи крови;
  • за два дня не пить алкоголь и не употреблять жирное
Инфекции мочевыводящих и половых органов Женщины
  • не использовать вагинальные препараты;
  • за 5 дней до ПЦР не делать кольпоскопию и трансвагинальное УЗИ;
  • не сдавать анализ во время месячных;
  • воздержаться от интимной жизни за 3 дня до обследования;
  • подмываться простой водой без применения моющих средств;
  • не делать спринцевания;
  • не мочиться за 2 часа до ПЦР
Мужчины
  • за 3 дня воздержаться от интимных отношений;
  • мыть половые органы простой водой без мыла;
  • не ходить в туалет «по-маленькому» за 3 часа до сдачи анализа
ЛОР инфекции (мазок носо- и ротоглотки) Мужчины, Женщины
  • не применять лекарства для носа и полости рта;
  • не курить за час;
  • за 2-3 часа не есть;
  • не чистить зубы

Проведение анализа

Анализ делается в специализированных лабораториях. Порядок проведения исследования описан в специальном медицинском протоколе.

Весь процесс осуществляется в несколько основных этапов:

  1. Сбор материала. Его осуществляют в процедурном кабинете конкретного профиля. Инструменты и посуда должны быть стерильными.
  2. Хранение и доставка биологического материала. При температуре около 20 градусов держать пробу можно не более двух часов. В охлаждённом состоянии материал допускается хранить одни сутки. Пробу можно заморозить на срок до двух недель. Если требуется транспортировка, осуществлять её необходимо при использовании термоконтейнеров.
  3. Выделение ДНК. Проводится разными способами в зависимости от вида имеющегося материала и исследуемых микроорганизмов.
  4. ПЦР. Немного материала переносят в специальную ёмкость, добавляют амплификационную смесь. Этот сосуд устанавливают внутрь программируемого прибора, где происходит автоматическое удвоение ДНК. Процесс может длиться до 3 часов. Параллельно с этим проводят ещё два исследования — положительное (содержит исследуемое ДНК) и отрицательное.
  5. Регистрация полученного результата. Участок ДНК выделяют при помощи электрофореза при добавлении бромистого этидия. Когда он соединяется с ДНК, то образуются светящиеся полосочки. Образец анализируют в ультрафиолете. Если имеются светящиеся полосы оранжевой окраски, то получен положительный результат. При наличии современного анализатора ПЦР этапы по выделению ДНК, амплификации и определению возбудителя могут быть выполнены прибором в автоматизированном режиме. Участия человека при этом не требуется.
  6. Интерпретация результатов. Положительный итог исследования говорит о присутствии инфекции. Количественная оценка может показать степень тяжести заболевания.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Наполнение пробирок образцами крови

Расшифровка результатов

В заключении исследования даётся однозначный ответ о наличии возбудителя, который бывает:

  • отрицательным, это означает, что инфекции нет;
  • положительным – она есть.

Выявление инфекции может произойти и при отсутствии симптомов болезни у человека. Это начальная стадия заражения. Иногда можно получить ложноположительный ответ (на грани отрицательного и положительного результата). В этом случае анализ необходимо сделать повторно. Особое внимание нужно уделить тому, чтобы материал был собран при полном соблюдении всех требований.

Сроки готовности ПЦР-анализа

На практике результат исследования можно получить через 2 дня. Иногда его могут сделать быстрее – в день сдачи.

Цена на проведение процедуры

Стоимость ПЦР определяется тем, какую инфекцию будут исследовать. Также она зависит от методики проводимого тестирования. Средняя цена анализа находится в пределах от 200 до 850 руб. В стоимость входит и плата за забор материала — около 400 руб.

Ориентировочные цены на исследование ПЦР.

Исследуемая инфекция Цена, руб
ВПЧ 360-1920
Хламидия 800
Краснуха 830
Микоплазма хоминис 560
Кандида 590
Микоплазма гениталиум 370
Герпес 360-610
Гонококк 370
Уреплазма 360

Зачастую медицинские учреждения предлагают провести анализ одновременно на несколько инфекций, чтобы выявить нужную. Такое обследование будет стоить дороже, но оно избавит от необходимости дополнительных исследований, что сэкономит время пациента.

Видео «Полимеразная цепная реакция»

В ролике рассказывается о сущности метода ПЦР и его преимуществах. Снято каналом SiberianMedicalLaboratory.

Читайте также:  Высыпания на половых органах: чем опасны и какие анализы сдать

Источник: https://hromosoma.com/dnk/ptsr-diagnostika-chto-eto-takoe-716/

Пцр анализ: что это такое и что он показывает (расшифровка)

Инфекционные заболевания представляют угрозу для человечества. Они способны годами разрушать организм без внешних проявлений. Инфекции запускают изменения в клетках и тканях – развиваются воспаления, образуются атипичные клетки.

ПЦР анализ относительно недавно стал использоваться в практической медицине, но завоевал славу самого результативного.

С его помощью можно констатировать заражение патологическими микробами задолго до проявления клинических симптомов инфекционного заболевания.

Общие сведения о методе

Методика ПЦР (полимеразной цепной реакции) разработана микробиологом Кери Мюллисом. В 1993 ученый получил за нее Нобелевскую премию.

С тех пор метод стали активно внедрять в работу медицинских лабораторий, как самый перспективный, точный и универсальный способ обнаружения различных инфекционных агентов.

ПЦР продолжают использовать и в научных целях, для исследования малоизученных микроорганизмов.

Методика базируется на законе природы и микробиологии – все живые существа имеют уникальную ДНК или РНК, состоящую из цепочек нуклеотидов, расположенных в особой последовательности. Зная ее, можно выявить любой микроорганизм. Единственная проблема – его необходимо найти.

В организме человека прячутся несметные количества микроскопических организмов. Иногда заражение происходит при контакте с единицами микробов. До создания ПЦР-диагностики выявить их было практически невозможно.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Метод подразумевает создание условий для усиленной репликации (деления) чужеродных фрагментов ДНК. Чем их больше – тем проще определить вид возбудителя. Для проведения анализов применяют специальное оборудование и ферментные системы. В комплексе они обеспечивают быстрое размножение искомой ДНК до того момента, пока ее можно будет обнаружить.

Что определяет

Сферы применения ПЦР-диагностики чрезвычайно обширны. По описываемому принципу можно найти любой микроб. Будь то грибок, бактерия, вирус или простейшие. Анализ используют для выявления:

  • всех типов вируса гепатита;
  • вирусов герпеса;
  • микроорганизмов, провоцирующих половые инфекции (уреоплазма, гарднерелла, микоплазма, трихомонады, хламидии);
  • ВИЧ;
  • микобактерии туберкулеза;
  • хеликобактер пилори;
  • грибков;
  • энцефалитного клеща;
  • листерий;
  • ВПЧ.

Характерной особенностью для ПЦР выступает возможность выявления единичных фрагментов генетического материала возбудителя, на что не способны другие типы лабораторной диагностики.

Как выявляют инфекцию

Для проведения ПЦР-диагностики необходим биоматериал – биологическая жидкость или ткань, в которой (теоретически) «селятся» микроорганизмы сразу после попадания в человеческое тело. Используют мокроту, частички эпителиальной ткани, соскобы со слизистых оболочек (мазки), кровь, мочу, мокроту, выделения из желез.

Сразу после забора биоматериал помещают в специальную стерильную транспортную среду. Это важно для профилактики обсеменения другими микроорганизмами из воздуха. К полученному материалу добавляют ферментные системы.

Они состоят из специфических цепочек ДНК или РНК, способных «распознать» родственные им фрагменты.

Обработанный материал помещают в специальное оборудование, где он выдерживается на протяжении определенного времени при максимально благоприятном температурном режиме.

После смешивания с ферментной системой, инфекционные фрагменты ДНК восстанавливают целостность и приобретают способность к делению. Размножение материала происходит в геометрической прогрессии.

Средний цикл цепной реакции занимает около 3 минут. Это значит, что спустя 3 часа пребывания в устройстве, в биоматериале будет то количество цепочек ДНК или РНК, которое позволит найти и идентифицировать возбудителя.

Какие результаты получит пациент

ПЦР-диагностика на любую инфекцию дает 2 варианта результатов – положительный или отрицательный. Анализ только подтверждает или исключает наличие чужеродного агента в организме.

То есть, опираясь на результаты диагностики, врач может констатировать или опровергнуть факт заражения. Судить о давности развития инфекции или интенсивности деления микроорганизмов не приходится.

Для этого применяются ИФА-тесты, базирующиеся на выявлении и подсчете количества антител, сформировавшихся при иммунном ответе.

Поскольку ПЦР-диагностику проводят для выявления патогенных микроорганизмов, факт заражения означает только одно – будет проведено дообследование и назначено лечение. Отрицательный результат также однозначен – организм пациента не пребывал в контакте с инфекцией.

ПЦР анализ что это такое: как проводят анализ, когда назначают.

Расшифровывать результат анализа должен врач. Пребывание инфекции в теле не всегда означает болезнь. Возбудитель может сосуществовать с человеком латентно (скрыто) и никак не беспокоить «хозяина».

О недостатках и преимуществах

Метод полимеразной цепной реакции считается самым прогрессивным способом лабораторной диагностики и используется практически во всех сферах медицины. Способствует тому множество преимуществ методики.

Высокие показатели точности и чувствительности

ПЦР дает достоверные результаты. Точность метода на сотые доли превышает 99.9%. Мизерную часть сомнений можно оставить на случай форс-мажора в лаборатории, что бывает крайне редко.

Более того, в отличие от остальных методов диагностики, ПЦР срабатывает практически сразу после заражения. Вероятность ложноотрицательного результата при ВИЧ присутствует на протяжении 2 недель после контакта с носителем инфекции (усредненный показатель).

Однако даже если возбудитель не активизировался сразу, а начал бессимптомно «жить» в организме, ПЦР его «увидит».

Специфичность

Полимеразная цепная реакция подразумевает выявление только искомого возбудителя инфекции. Для этого используются высокоспецифичные ферментные системы, способные активизировать отдельные гены микроорганизмов. При исследовании мазков со слизистых, не учитываются показатели условно-патогенной микрофлоры, а находятся только болезнетворные микробы.

Методика постоянно совершенствуется. Некоторые лаборатории предлагают провести ПЦР диагностику сразу на несколько болезнетворных микробов. Это добавляет к специфичности анализа характеристику универсальности.

С данной целью применяют унифицированные ферментные системы, способные запустить деление нескольких типов инфекции. Наиболее востребованы комплексные анализы в урологии и гинекологии.

В данных сферах часто встречаются опасные инфекции, способные вызвать необратимые изменения в организме инфицированного человека. Мазки из урогенитального тракта исследуют одновременно на 3, 5, 9 и даже 13 микроорганизмов.

Однократный забор биоматериала для изучения, позволяет выявить сразу все микробы, которые потенциально могут присутствовать в исследуемой среде.

Скорость

Результаты ПЦР-тестов обычно готовы на следующий день после забора биоматериала. Некоторые лаборатории предоставляют их уже через несколько часов (в печатном, устном, электронном форматах). Сроки готовности результатов зависят от технических возможностей медицинского учреждения. Чем оно «богаче», тем лучше и современнее технологическая база и, тем быстрее готовятся результаты анализов.

Недостатки метода

Несмотря на все «дифирамбы» у методики есть и недостатки. По сравнению с количеством и важностью достоинств, они менее существенны.

Первый недостаток кроется в стоимости. Анализ нельзя отнести к дорогим или доступным. Все зависит от того, каким оборудованием пользуется лаборатория. Технологическое оборудование для проведения ПЦР-анализов дорогостоящее.

Потребуются специальные агрегаты, очистительные приспособления для воздуха и биоматериала, устройства для его хранения, транспортировки, ферментные системы. Лаборатория понесет затраты на обучение медицинского персонала. При заборе проб важно обеспечить их стерильность, минимизировать риск обсеменения в процессе транспортировки и исследования.

Для этого медицинский персонал изучает четкие инструкции. Только после специального обучения сотрудников допускают к работе с аппаратурой.

Специалисты рекомендуют сдавать ПЦР-анализы в лабораториях с многоуровневой проверкой качества результатов. Это сводит риск ошибки почти к нулю.

Забор материала и его первичную обработку перед аппаратным исследованием проводит человек, поэтому нельзя исключаться человеческий фактор ошибки. Вероятность контакта минимальна и даже исключена, если забор выполняет обученный человек. Однако сотые доли риска нарушений все равно присутствуют.

Когда нужно проводить ПЦР-диагностику

Сдавать биоматериал для анализа необходимо по рекомендации лечащего или семейного врача. Если доктор подозревает пребывание пациента в очаге инфекции или контакт с ее носителем, он посоветует незамедлительно сдать анализ. Заблаговременное обследование поможет диагностировать инфекцию как можно раньше.

В частных лабораториях можно сдать целые «панели» ПЦР-анализов без назначения врача. Пациенты могут обследоваться по собственному желанию (анонимно), а также в профилактических целях. Ответственный подход к своему здоровью приветствуется, однако расшифровкой результатов диагностики должен заниматься специалист.

Врачи рекомендуют сдавать некоторые анализы на регулярной основе – ВИЧ, сифилис, гепатиты. Заражение может произойти незаметно. В начале развития заболевания симптомы возникают не всегда. Чем раньше выявить возбудителя, тем скорее можно начать лечение и предотвратить неисправимый ущерб для здоровья.

Комплексную ПЦР-диагностику можно (и нужно) проходить на этапе планирования беременности, после незащищенных сексуальных контактов (с малоизвестной личностью, при изнасиловании), пребывания в местах, где зарегистрирована вспышка инфекции.

ПЦР – современный и качественный способ выявления инфекционных заболеваний.

Анализы этого типа назначают перед определением окончательного диагноза, при постановке на диспансерный учет, перед проведением хирургических вмешательств. Чтобы получить достоверные результаты нужно подготовиться.

Кровь сдают утром натощак, мазки урогенитального тракта – при условии 3 дней полового воздержания, мокроту и частицы эпителия – в стерильных лабораторных условиях.

Источник: https://GribokExpert.ru/analizy/chto-takoe-ptsr-analiz

Пцр анализ как метод выявления инфекций

воскресенье, апреля 3, 2016 — 00:08

Полимеразная цепная реакция, или ПЦР анализ, является методом диагностирования инфекционных возбудителей в организме. Применяется в гинекологии для выявления инфекций, которые передаются половым путем. Данное исследование было предложено в 1983 американским ученым Мюллисом, который изначально применял его для исследовательских целей, а позже ввел и в практическую медицину.

За открытие данного метода ученый был награжден Нобелевской премией. Преимущество данного исследования состоит в том, что в отличие от других диагностических методов, ПРЦ анализ очень редко дает ложноотрицательные и ложноположительные результаты.

ПЦР исследование основано на принципе определения ДНК. Как известно, каждый живой организм содержит генетический код, за который отвечает дезоксирибонуклеиновая кислота (ДНК). Она состоит из нуклеотидов, которые соединяются, соблюдая правило комплементарности.

Для определения инфекции в организме хватает малого участка генетической информации того или иного возбудителя. Принцип работы анализа ПЦР как раз и построен на выявлении небольшого генетического фрагмента микроорганизма.

Для разных возбудителей создан определенный детектор, который, соблюдая правило комплементарности, точно находит свой фрагмент, поэтому определить таким образом, какой микроорганизм вызвал инфекцию, не составит огромного труда.

С помощью анализа ПЦР успешно выявляют:б

  • Гепатит вирусной этиологии
  • Сальмонеллу
  • Дифтерийную палочку
  • Холеру
  • Токсоплазмоз
  • Цитомегаловирус
  • СПИД
  • Хламидии и уреаплазмы
  • Микоплазмоз
  • Кандидоз и гарднерелез
  • Трихомонаду
  • Папилломавирусную инфекцию
  • Герпесная инфекция, которая является довольно опасным заболеванием и долгое время может находиться в спящем состоянии.
  • Хеликобактер
  • Вирусы гриппа группы А и В

Для определения заболеваний, передающихся половым путем (ЗППП), в гинекологии анализ ПЦР является необходимой процедурой при исследовании болезней женских половых органов.

Читайте также:  Что такое гарднерелла, и откуда она берется. какие симптомы вызывает гарднерелла.

Данная диагностическая процедура назначается для определения:

  • Причин хронических воспалений мочеполовых путей
  • В случае тяжелой беременности
  • Острые стадии ЗПП
  • Хронические фазы ЗППП
  • Определения причин бесплодия
  • Проверка результативности лечения антибиотиками
  • Выявление чувствительности или иммунитета к определенным видам антибиотика
  • Контроль донорской крови

Анализ ПЦР стал незаменимым, поскольку позволяет определить и изучить заболевания в хронической стадии, а также редкие и плохо изученные инфекции.

Какой биологический материал используют для ПЦР анализа?

Для определения возбудителя разных инфекций забор материала может отличаться.

У женщин для определения заболеваний, которые передаются половым путем, анализ берется из шейки матки, мочеиспускательного канала, а также исследуются выделения из влагалища и моча.

Для определения гепатита С вирусной этиологии, а также ВИЧ и СПИДа на исследование берут кровь из вены. У мужчин для определения ЗППП берется мазок из мочеиспускательного канала, выделения, если таковые присутствуют, и моча.

Когда врач назначает ПЦР анализ, многие пациенты отказываются от него, аргументируя тем, что он достаточно дорогой, а точность результата неизвестна. Это большое заблуждение. Рассмотрим, каковы же минусы и плюсы данного вида диагностики.

Плюсы исследования:

  • Универсален.Данный анализ позволяет выявить различные ДНК и РНК тогда, когда другие методы исследования не работают. Позволяет определить не только наличие возбудителя, его тип, а также количественное соотношение данного микроорганизма.
  • Высокая специфика (точность 100%).Это значит, что в процессе исследования определяется последовательность нуклеотидов, характерная для отдельно взятого микроорганизма. К тому же, оборудование позволяет определить наличие других возбудителей в том же материале, и это никак не влияет на точность и качество ответа.
  • Высокая чувствительность к выявлению возбудителей инфекции. Выявить микроорганизм возможно даже при минимальном содержании ДНК в биологическом материале
  • Быстрота проведения диагностики. Процесс занимает всего несколько часов, поэтому результат пациент сможет получить уже на следующий день.
  • ПЦР анализ выявляет именно наличие инфекции, а не реакцию организма на нее. Поэтому определить наличие патогенных организмов можно еще в состоянии сна инфекции или в инкубационном периоде.

Минусы диагностики с помощью ПЦР анализа:

  • Результат анализа во многом зависит от того, как проводилось исследование и в каком помещении. Из-за высокой чувствительности в материал могут проникнуть чужеродные микроорганизмы из внешней среды, поэтому в лабораториях обязательны биологические фильтры воздуха с высокой степенью фильтрации.
  • Брать анализ и оценивать результаты должен исключительно лечащий врач. Это важно потому что не всегда положительный результат является заболеванием. Возможно, пациент уже прошел курс лечения, а инфекция и возбудители удаляются из организма не сразу.
  • И, конечно, от правильности взятия анализа зависит точность ответа. Проводить анализ обязан только врач, который имеет квалификацию и четкие инструкции от лаборатории по взятию материала для пцр анализа.

Когда врач назначает ПЦР анализ

Данное исследование назначает специалист в случае жалоб пациента на необычные и симптомы:

  • Зуд и жжение в области половых органов
  • Обильные выделения с неприятным запахом, изменившейся консистенцией и цветом.
  • Боли внизу живота, а также при мочеиспускании
  • Также Вы можете попросить врача провести обследование, если имел место незащищенный половой контакт с неизвестным партнером.

Также данное исследование назначают молодым парам, которые хотят родить здорового малыша, и беременным.

Как подготовиться к сдаче анализа ПЦР:

  • Исключены половые контакты за 36 часов
  • Нельзя мочиться 3 часа до забора материала
  • Запрещен прием антибиотиков и использование вагинальных бактерицидных свечей
  • Запрещено спринцевание и сдача анализа во время месячных
  • Запрещено использовать антибактериальное мыло

ПЦР анализ на сегодняшний день является одним из самых эффективных и мощных методов исследования. В большинстве случаев он используется для выявления инфекций, передающихся половым путем.

Новейшее оборудование позволяет за одно исследование выявить от 5 до 13 инфекций, что весьма облегчает жизнь, как пациентам, так и врачам, которые основываясь на результаты, могут установить правильный и точный диагноз и назначить эффективное лечение.

Несмотря на универсальность исследования ПЦР, необходимо использовать и другие методы, для того чтобы определить и правильно оценить ответ иммунной системы организма. Зачастую анализ комбинируют с серологическими методами исследования.

В случае, если вы сдаете анализ ПЦР, самостоятельно обратившись в лабораторию, при положительных результатах исследования не стоит откладывать посещение врача, так как большинство возбудителей способны негативно сказываться как на репродуктивной системе, так и на здоровье организма в целом.

ПЦР, Бесплодие, ДНК, анализы

Источник: http://www.probirka.org/diagnostika-besplodiya/9151-ptsr-analiz-kak-metod-viyavleniya-infektsiy.html

Анализ ПЦР — что это такое. Расшифровка и цена

Анализ пцр — это инновационная лабораторная диагностическая методика, конечной целью которой выступает обнаружение патогенных микроорганизмов, вирусов и инфекций.

Полимеразная цепная реакция понятна далеко не каждому, ведь в ее сути способен разобраться только специалист.

Главное, что данная методика дает хорошие результаты и позволяет выявить труднодоступные и скрытые патологии.

Анализ пцр относительно молодой, ему около 30-ти лет. Данная методика исследования прошла все этапы эволюции и сегодня является одной из самых информативных. Смысл заключается в многократном увеличении ДНК искусственным образом. Осуществляется повторение той части, которая имеется лишь у определенной разновидности патогенного возбудителя.

Время воздействия составляет три минуты. Достаточно около тридцати таких этапов, чтобы вышло нужное число молекул для четкого выявления агента способом электрофореза.

Кроме этого медики сращивают части ДНК, выполняют различные мутации, что позволяет применять анализ пцр диагностику не только с целью выявления инфекционных и генетических нарушений, но и для подтверждения или опровержения родственных связей, клонирования и прочее.

Проведение пцр анализа осуществляется в специальных медицинских учреждениях с применением специализированной техники.

Расшифровка

Значения могут носить отрицательный либо положительный характер. В первом случае можно говорить о том, что никаких инфекций и патологий не выявлено, во втором, они обнаружены и человек заражен.

Часто позитивный результат наблюдается у носителей инфекций, но при этом люди себя абсолютно нормально чувствуют, ни на что не жалуются. Нужно отметить, что это ранняя стадия болезни, которая пока себя не проявила, нужна консультация доктора. Когда недуг был обнаружен, нужно обязательно предпринять терапевтические меры.

Пцр диагностика инфекций выступает на сегодняшний день самым точным исследованием и позволяет безошибочно определить наличие вредителя.

Подготовка к исследованию

Все зависит от разновидности изучаемого материала. Анализ крови пцр сдается в утреннее время на голодный желудок. Анализ кала на пцр и мочи сдается аналогично, материал берут чистыми приспособлениями и кладут в стерильный контейнер.

Если нужно исследовать мазок либо соскоб, тогда следует исключить половую связь за несколько суток до мероприятия, в том числе и спринцевания. Воздержитесь от сдачи анализа в период месячных и еще на протяжении двух дней после их окончания.

Проведение анализа пцр

Выполняется данное исследование в лабораторных условиях. Мероприятие состоит из нескольких этапов:

  1. Забор материала выполняется в кабинете медицинского учреждения. Все оборудование и принадлежности должны быть стерильными.
  2. Материал хранится под определенной температурой, не дольше двух часов по времени. При более продолжительном сбережении пробирка помещается в холодильник. Если нужно сохранить материал на две недели, тогда его замораживают. Перевозится в специально отведенных для этой цели контейнерах.
  3. Выделение ДНК. Все зависит от типа интересующего представителя патогенной флоры. Применяются методики твердофазной сорбции и др.
  4. Материал помещают в специальную центрифугу. Автоматически делается амплификация. Длится манипуляция от двух до трех часов. Число циклов колеблется от 30 до 40-ка.
  5. Фиксирование полученных данных. Фрагменты выделяются способом электрофореза. Образцы изучаются в ультрафиолетовом свечении. Появление оранжевой полосы говорит о позитивном результате.
  6. Трактовка полученных данных. Бывает положительной и отрицательной, количество интерпретирует доктор. На его основании делают выводы о прогрессировании болезни, и определяется тактика лечения.

Где и для чего используется

Анализ днк методом пцр применяется в самых разных сферах. Сегодня это один из самых популярных диагностических способов, который является приоритетным:

  • в гинекологии. Позволяет определить ряд инфекций: ВПЧ, хламидиоз, гарднереллы и многое другое. Обнаружение вирусов и инфекций позволяет предпринять своевременно меры по предотвращению рака шейки матки;
  • в неонатологии. Известно множество патологий, которые способны вредить плоду еще в материнской утробе;
  • в службе крови. Пациенты с тяжелыми диагнозами типа сифилиса, ВИЧ и др., проходят пцр диагностику. Она определяет даже скрытые инфекции, которые невозможно выявить с помощью обычных серологических методов;
  • при подозрении инфекций, также делается пцр анализ на зппп. С помощью него удается выявить вирусы гепатита, нередко назначают делать анализ пцр на вич и другие инфекции;
  • в пульмонологии назначается при подозрении на воспаление легких, наличие бронхитов. Делается также анализ крови пцр на туберкулез, что позволяет определить недуг на начальном этапе развития.

В мед учреждениях обычно предлагается комплексный пцр анализ для определения целых групп инфекций.

Пцр анализ при беременности

В период вынашивания любой недуг может негативно повлиять на внутриутробное развитие плода. Чем быстрее врачу удастся определить возбудителя, тем быстрее можно будет назначить эффективную тактику терапии. Нельзя ждать и использовать малоинформативные методы, так как это может привести к прогрессированию заболевания и даже гибели ребенка.

Анализ пцр у мужчин

Мазок у мужчин чаще всего берут из мочеиспускательного канала. Необходимо его сдать в случае подозрения на наличие инфекций, заболеваний с вялотекущей клиникой, а также в случае обнаружения патологий у партнерши.

Предпосылками для назначения данного исследования служат:

  • наличие выделений;
  • болезненные ощущения при мочеиспускании;
  • покраснения и отеки;
  • сыпь;
  • постоянные позывы в туалет;
  • воспаления мочеполовой сферы;
  • подозрения на любые зппп;
  • проблемы с репродуктивной функцией;
  • профилактика.

Сдают такой анализ по рекомендации доктора.

Пцр анализ: цена

Стоимость зависит от того, на какой именно тип инфекции человек желает провериться. Также есть два способа проведения исследования: качественная и количественная методика. К тому же в разных клиниках действует своя ценовая политика, которую необходимо уточнять.

Источник: https://xmedicin.com/analiz-ptsr/

Ссылка на основную публикацию
Adblock
detector